24小时热门版块排行榜    

查看: 1135  |  回复: 7

onetwo哥

新虫 (小有名气)

[交流] 蛋白质纯化之凝胶过滤层析损失多 已有3人参与

我做蛋白质晶体结晶,因此需要高纯度的蛋白质样品。一般会依次经过Ni柱亲和层析,离子交换层析和凝胶过滤层析。最近我发现,样品在过完凝胶过滤层析后损失了很多,请问大家可能是哪里出问题了呢?

发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘洪振

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
是需要提纯吗,可以用离心浓缩仪

发自小木虫Android客户端
长恨人心不如水,等闲平地起波澜
2楼2023-06-18 18:04:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

onetwo哥

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 刘洪振 at 2023-06-18 18:04:04
是需要提纯吗,可以用离心浓缩仪

不仅仅是提高浓度,还需要去除其他杂蛋白

发自小木虫Android客户端
3楼2023-06-18 23:32:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘洪振

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
那得先用其他溶剂萃取下

发自小木虫Android客户端
长恨人心不如水,等闲平地起波澜
4楼2023-06-19 08:54:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

onetwo哥

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 刘洪振 at 2023-06-19 08:54:37
那得先用其他溶剂萃取下

蛋白也能萃取?

发自小木虫Android客户端
5楼2023-06-19 09:14:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jieqi0_0

铁虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
是要提供浓缩管离心浓缩,然后再inject到凝胶过滤层析进行纯化吗?这样的话可能会在浓缩管这一步损失10-30%蛋白含量
既出发,必到达
6楼2023-10-09 16:33:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

onetwo哥

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 南工齐杰 at 2023-10-09 16:33:21
是要提供浓缩管离心浓缩,然后再inject到凝胶过滤层析进行纯化吗?这样的话可能会在浓缩管这一步损失10-30%蛋白含量

是的,浓缩之后再上样

发自小木虫Android客户端
7楼2023-10-10 10:35:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

纯化扫地僧

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
如果分子筛和以前柱行为不一样,该重装柱子了
做简单的纯化,做高纯度的纯化
8楼2023-10-13 09:12:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 onetwo哥 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 293求调剂 +12 zjl的号 2026-03-16 17/850 2026-03-22 16:51 by i_cooler
[考研] 求调剂院校信息 +6 CX 330 2026-03-21 6/300 2026-03-22 15:25 by 无懈可击111
[考研] 一志愿中南大学化学学硕0703总分337求调剂 +3 niko- 2026-03-22 3/150 2026-03-22 15:15 by 杨杨杨紫
[考研] 285求调剂 +6 ytter 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:09 by 星空星月
[基金申请] 山东省面上项目限额评审 +4 石瑞0426 2026-03-19 4/200 2026-03-22 08:50 by Wei_ren
[考研] 302求调剂 +12 呼呼呼。。。。 2026-03-17 12/600 2026-03-21 17:29 by ColorlessPI
[考研] 材料与化工(0856)304求 B区 调剂 +3 邱gl 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:47 by lature00
[考研] 332求调剂 +3 凤凰院丁真 2026-03-20 3/150 2026-03-21 10:27 by luoyongfeng
[考研] 求调剂 +6 Mqqqqqq 2026-03-19 6/300 2026-03-21 08:04 by JourneyLucky
[考研] 机械专硕299求调剂至材料 +3 kkcoco25 2026-03-16 4/200 2026-03-21 03:52 by JourneyLucky
[考研] 一志愿中国石油大学(华东) 本科齐鲁工业大学 +3 石能伟 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:22 by JourneyLucky
[考研] 华东师范大学-071000生物学-293分-求调剂 +3 研究生何瑶明 2026-03-18 3/150 2026-03-21 01:30 by JourneyLucky
[考研] A区线材料学调剂 +5 周周无极 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:33 by laoshidan
[考研] 一志愿西南交通 专硕 材料355 本科双非 求调剂 +5 西南交通专材355 2026-03-19 5/250 2026-03-20 21:10 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南理工085701环境302求调剂院校 +3 葵梓卫队 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:28 by zhukairuo
[考研] 一志愿中国海洋大学,生物学,301分,求调剂 +5 1孙悟空 2026-03-17 6/300 2026-03-19 23:46 by zcl123
[考研] 286求调剂 +6 lemonzzn 2026-03-16 10/500 2026-03-19 14:31 by lemonzzn
[考研] 0854可跨调剂,一作一项核心论文五项专利,省、国级证书40+数一英一287 +8 小李0854 2026-03-16 8/400 2026-03-18 14:35 by 搏击518
[考研] 材料,纺织,生物(0856、0710),化学招生啦 +3 Eember. 2026-03-17 9/450 2026-03-18 10:28 by Eember.
[考博] 26博士申请 +3 1042136743 2026-03-17 3/150 2026-03-17 23:30 by 轻松不少随
信息提示
请填处理意见