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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 胶回收的残余乙醇会影响连接效率吗？
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nicole1124

新虫 (小有名气)

[交流] 胶回收的残余乙醇会影响连接效率吗？

加了wash buffer后离了30S，然后忘了空离2分钟，就直接加了elution buffer，后面连接反应10ul 体系，这个片段加了4ul，会不会影响连接酶活性啊？怎么去除里面的乙醇呢，水浴蒸发一下可以吗？
高手帮帮忙吧，谢谢了~

[ Last edited by amisking on 2009-10-3 at 18:21 ]
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1楼 2009-10-03 16:34:53
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nicole1124

新虫 (小有名气)
这么复杂哦？一定要完全干燥才能挥发啊。。。
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4楼2009-10-03 17:22:09
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查看全部 13 个回答

gastrodia

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
nicole1124(金币+2,VIP+0): 10-3 10:01
amisking(金币+2,VIP+0): 10-3 17:07
会影响，你可以尝试一下4度连接过夜，再转化，如果不行，就重做吧
这个片段加4ul，为什么10ul的体系中重要的是载体和片段的摩尔比要合适。
赞一下(13人) 回复此楼
2楼2009-10-03 16:51:16
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gastrodia

金虫 (正式写手)
★ ★
nicole1124(金币+1,VIP+0): 10-3 10:01
amisking(金币+1,VIP+0): 10-3 17:07
要偷懒也成，直接挥发干燥后，使用真空干燥仪，很快的，干燥后重新加同体积的ddH2O溶解即可
赞一下(12人) 回复此楼
3楼2009-10-03 16:52:27
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pph0259

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by nicole1124 at 2009-10-3 17:22:
这么复杂哦？一定要完全干燥才能挥发啊。。。

废话！
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5楼2009-10-03 23:04:09
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