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mzqpony

金虫 (正式写手)

[交流] sma1酶切

sma1酶切后可以保存多长时间,DNA片段与载体连接后又怎么保存,保存时间可以多长?如果没有转化完可以保存连接产物吗?
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★ ★ ★ ★ ★
amisking(金币+3,VIP+0): 10-3 14:58
mzqpony(金币+3,VIP+0):谢谢 10-3 15:17
平端理论上比黏端稳定性强,放在4度可以久一点,但是没有做过具体实验,所以建议还是不要超过一周
连接物可以放在四度,没有什么问题
当然也不要放太久,毕竟会缓慢降解,多多少少会混点DNase的
最好还是一周内做完吧
个人感觉黏端就需要两三天内搞定
2楼2009-10-03 14:46:16
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honghui9251

铜虫 (小有名气)


mzqpony(金币+1,VIP+0):Thanks 10-4 18:52
酶切过后最好做个纯化
连接产物要要转化宿主菌(一般是大肠杆菌),扩增
这样才能达到保存的目的
如果不转化,建议放在-20度以上,不超过半年
3楼2009-10-04 10:08:35
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海之恋

银虫 (小有名气)


mzqpony(金币+1,VIP+0):Thanks 10-4 18:52
Sal酶切后放-20°可以放上几个月。因为我的质粒Sal切后放-20°放了两个月后做连接,也能连接上。连接完后最好尽快做转化。连接时间太长效果不好。我们一般连36个小时效果很好。当然不同的菌也不一样。
4楼2009-10-04 11:45:22
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