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刘茯柚

新虫 (初入文坛)

[求助] DNA醇沉产生大量难溶于水的白色沉淀,怎么避免 已有1人参与

我DNA溶液里面含0.05M甘氨酸+12mM磷酸二氢钠+0.1M氯化钠, pH=10,加等体积异丙醇,-20摄氏度,2小时,离心后发现生成了超多白色沉淀,70%乙醇洗不掉,后面重新溶解于100μL水溶解不掉,加到1mL,也没有溶解完全。 用qubit定量发现,加多的水,测得的DNA总量变多了,应该是之前白色沉淀中还掺有没溶解掉的DNA。可是我试了一下,发现磷酸二氢钠在70%乙醇里溶解度还挺好的,单独甘氨酸进行异丙醇沉淀也没有出现过这种情况, 怎么办啊,有没有有经验的虫虫帮帮我,非常非常感谢~
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金虫 (小有名气)

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多糖多酚材料容易出现这个问题,比如你提取种子的DNA,另外你提取什么材料的DNA呢,为什么要用.05M甘氨酸+12mM磷酸二氢钠+0.1M氯化钠这些玩意,要是一般植物DNA的话CTAB或SDS就行,不需要这么复杂啊,
2楼2023-06-03 17:59:09
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