| 查看: 4654 | 回复: 11 | |||
[交流]
测序一直错误 已有5人参与
|
|
最近在把一段400bp左右的片段连接到载体上，用的是无缝克隆连接的，第一次连接完去测序，六个样品，每个都出现碱基缺失或者碱基错误，还都发生在中间部位，有的在同源臂连接部分，有的在序列中间，（错误都不在测序前后100bp内），换了一家无缝克隆的试剂盒（诺唯赞的）重新做了一次，最后取PCR产物去测序，结果又在不同的关键部位有碱基错误，每一个测序样品都是。实验做PCR全程用的高保真酶，现在不知道怎么办了以前做无缝克隆从来没有出现过这样的情况啊有没有大佬给指导一下啊 发自小木虫Android客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石
已经有0人回复
-
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有178人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
yudaoqian88
至尊木虫 (知名作家)
不良人
- MolEPI: 1
- 应助: 67 (初中生)
- 金币: 25218.3
- 散金: 410
- 红花: 34
- 沙发: 15
- 帖子: 7536
- 在线: 964.3小时
- 虫号: 1430329
- 注册: 2011-10-07
- 性别: GG
- 专业: 作物种质资源与遗传育种学
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
1，你可以找小伙伴顺带帮你做一遍，看结果是否一样。2，多个样品出现序列与参考序列不一致，考虑是不是序列本身就是这样的。可以把两次的测序结果进行比对，看错误匹配处碱基是否一致，如果是一样的，那表明你所用材料里的目标序列就是这样的。 发自小木虫Android客户端 |
2楼2023-05-25 22:25:58
shuaibia6
金虫 (小有名气)
- 应助: 40 (小学生)
- 金币: 1309.9
- 散金: 5
- 帖子: 123
- 在线: 214.5小时
- 虫号: 27620688
- 注册: 2021-10-26
- 专业: 生物大分子结构与功能
3楼2023-05-26 08:48:38
4楼2023-05-26 11:13:05
 |
5楼2023-05-26 11:14:09
乌克兰跑男
铜虫 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1588
- 散金: 420
- 帖子: 663
- 在线: 55.1小时
- 虫号: 29162179
- 注册: 2022-03-15
- 性别: GG
- 专业: 水产生物免疫学与病害控制
6楼2023-05-26 12:07:39
shuaibia6
金虫 (小有名气)
- 应助: 40 (小学生)
- 金币: 1309.9
- 散金: 5
- 帖子: 123
- 在线: 214.5小时
- 虫号: 27620688
- 注册: 2021-10-26
- 专业: 生物大分子结构与功能
7楼2023-05-26 15:06:15
wenting8918
木虫 (正式写手)
小硕
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 5256.7
- 散金: 412
- 红花: 7
- 帖子: 806
- 在线: 336.2小时
- 虫号: 764447
- 注册: 2009-05-06
- 专业: 生物化学
8楼2023-05-28 09:58:02
wenting8918
木虫 (正式写手)
小硕
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 5256.7
- 散金: 412
- 红花: 7
- 帖子: 806
- 在线: 336.2小时
- 虫号: 764447
- 注册: 2009-05-06
- 专业: 生物化学
9楼2023-05-28 10:00:13
10楼2023-05-30 13:39:19