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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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孙韦地

新虫 (初入文坛)

[交流] 转化子假阳性 已有3人参与

自己PCR加his标签,双酶切连接之后热激转化,转化子假阳性是为什么呀?转化之后测序序列比对和目的片段不匹配,和载体匹配,说明载体和片段没连上,但是菌P验证的时候电泳胶上面有明亮的条带,用的感受态细胞是MC1061,载体是PNZ8148
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2019013672

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
his标签比较小吧,你确定菌p是his不是引物二聚体?有把菌p的进行胶回收送测看看嘛?确定是his的基因?你都送测没有检测到his的基因,his基因怎么可能单独存在菌里面,也许你没有连his的菌说不定也能p出来条带呢
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4楼2025-04-26 16:02:59
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ffplant

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
转化后涂平板挑菌做的吗?有可能是没连上但是你的平板表面有散落的目的片段,导致菌检扩增有条带但测序没有目的片段

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2楼2023-05-12 11:01:11
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1521894473

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
pnz8148载体转化到MC1061后,我的涂板不长菌(25μg/ml、10μg/ml氯霉素固体平板),转化到DH5α也不长,但是点涂还有明显亮的条带
3楼2023-11-16 14:31:50
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