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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 菌液PCR假阳性的多么
汕头大学海洋科学接受调剂
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guyue2885

银虫 (正式写手)

[交流] 菌液PCR假阳性的多么

蓝白斑筛选后，菌液PCR，后直接对阳性结果进行测序，不做酶切，可行否？菌液PCR假阳性的多么？
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1楼 2009-09-30 08:55:26
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mascotte

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
涂板时板上会含有未转入外源DNA的Ecoli.；转入外源DNA的Ecoli；未转入Ecoli的外源DNA。菌落或菌液PCR的时候因为模板（菌落或菌液）很可能含有做transformation时加入的ligation DNA，如果这些DNA很多的话，经过30多个循环扩增出阳性结果很正常，所以一定要经过酶切鉴定。
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10楼2009-09-30 23:32:48
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kxjh

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
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amisking(金币+2,VIP+0): 9-30 13:23
菌液PCR假阳性是挺多的，最好酶切后看到阳性目的片段再送去测序。不然耽误时间也浪费钱。
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2楼2009-09-30 09:35:31
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十比

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
楼上说的很对，假的太多
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3楼2009-09-30 11:27:36
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mcheng

铜虫 (初入文坛)
★
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一般来说菌落PCR假阳性是挺多的，不过你是在蓝白筛选的基础上再做菌落PCR我个人认为可靠性还是比较高的。
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6楼2009-09-30 16:10:27
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