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lxiaofeng

铁虫 (初入文坛)

[交流] 救命.....蛋白不表达

我是在酿酒酵母里表达一个比较特殊的蛋白,开始是想用信号肽把他分泌出来的,不成功;后来干脆就胞内表达了,但还是不成功,现在万分紧急,请教请教!!!!万分感激!!!!!    我是广东某高校的,如果有广州的同行当面指教的话,定毕酬谢!!!!
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+3,VIP+0): 10-8 15:49
楼主我给你说个我所经历的事,
我的一个同学也是酵母表达一个生长激素类的物质,
他的表达用SDS-PAGE根本看不到的,只能用免疫法鉴定。
他优化条件做了2年啊,博士的大好时光就这样过去了,然后不得不换课题,

所以,表达不好,很可能就是上游构建的不好,
只能在质粒或菌株方面改造一下,才能在优化上再花一定的时间!

所以我建议楼主,你如果用了半年时间优化,还得不到好的结果,
一定不要一条道走到黑啊~~~
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
4楼2009-09-30 10:03:15
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lxiaofeng

铁虫 (初入文坛)

我的手机是 15918479122(广州卡),定毕酬谢!!
2楼2009-09-29 19:36:03
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xiangao

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
难道是表达某种酶?? 胞外表达有点难,现在都在做表面展示吧
3楼2009-09-29 22:00:50
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lxiaofeng

铁虫 (初入文坛)

谢谢........我也做了2年了,也是用SDS-PAGE来检测,还是没法确定我的蛋白条带(考染),想做Western Blot但没抗体,请问大家有什么好建议吗????
5楼2009-09-30 10:20:54
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