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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » PMP柱前衍生化法问题
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cxmdl

新虫 (初入文坛)

[交流] PMP柱前衍生化法问题 已有2人参与

我现在在做分离纯化后纯化多糖的分析。
在用PMP柱前衍生化法分析单糖组成的时候，样品HPLC出来的峰是一个大峰，应该是多糖没有水解完全，我水解的条件是1ml 1mg/ml的多糖溶液加入0.5ml 3M 盐酸，110℃真空干燥箱中水解1小时。想问问各位老师同学我的方法有问题吗，或者是哪里改进比较好

PMP柱前衍生化法问题
单糖.jpg
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1楼 2023-05-05 19:09:37
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cxmdl

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by aspect3000 at 2023-05-06 06:41:23
均一多糖 ？

应该不是，是没水解出来，这个峰拉大是奇怪的峰型
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5楼2023-05-20 09:34:50
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aspect3000

至尊木虫 (知名作家)
均一多糖 ？

发自小木虫Android客户端
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2楼2023-05-06 06:41:23
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aoaolalxc

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
1、一般使用冻干粉+3M的盐酸，而不是1mg/mL的溶液+3M盐酸，这样酸的浓度会降低，不足以水解多糖；
2、时间拉长，可以尝试4~6h的水解时间，1h是有点短的
3、不知道是否与酸的种类有关，可以尝试一下2M~4M的TFA
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cxmdl
3楼2023-05-19 14:31:53
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cxmdl

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by aoaolalxc at 2023-05-19 14:31:53
1、一般使用冻干粉+3M的盐酸，而不是1mg/mL的溶液+3M盐酸，这样酸的浓度会降低，不足以水解多糖；
2、时间拉长，可以尝试4~6h的水解时间，1h是有点短的
3、不知道是否与酸的种类有关，可以尝试一下2M~4M的TFA

谢谢解答，不过冻干粉直接加3M盐酸是否会碳化呢，我查阅文献没找到冻干粉直接加3M盐酸，只找到冻干粉加三氟乙酸的。
因为实验室没有三氟乙酸，想先看看盐酸能不能出结果，不行再买三氟乙酸。
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4楼2023-05-20 09:32:14
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