24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 3194  |  回复: 5
【悬赏金币】回答本帖问题,作者superman.6将赠送您 20 个金币
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

superman.6

新虫 (小有名气)

[求助] 测序双峰问题 已有2人参与

菌落pcr(引物27f/1492r),前后两次测序结果都是正向正常,反向重叠峰。第一次出现这种情况后,我把我的菌种继续纯化了,但是第二次还是这样的结果,不知道什么原因了

发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

superman.6

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by KM石头 at 2023-04-26 10:18:22
楼主这个是测16s吧,你测序的引物是自己送到还是使用测序公司的,如果是自己的建议检查自己的引物是否有问题(是否污染);第二种方法,建议将PCR产物连到T载体上,再送质粒去测序,干扰会少很多

好的,谢谢。我想再问问,出现一端正常,一端重叠峰的情况,可以排除我的dna模板不纯的问题吗

发自小木虫Android客户端
4楼2023-04-26 10:35:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

Glenice Y

新虫 (正式写手)

为什么不送质粒测序,还是这个比较特殊

发自小木虫Android客户端
2楼2023-04-25 23:58:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

KM石头

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
楼主这个是测16s吧,你测序的引物是自己送到还是使用测序公司的,如果是自己的建议检查自己的引物是否有问题(是否污染);第二种方法,建议将PCR产物连到T载体上,再送质粒去测序,干扰会少很多
3楼2023-04-26 10:18:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shuaibia6

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有一种情况可以解释,就是你的菌落不纯,打个比方就是你的菌有2种,一种是A链正常的,一种是A链缺失的,它们的互补链B链都是正常的。这样你其中一条引物测序测的是A链,所以测序正常,另一条链测的是B链,因为存在2种型,一个正常一种缺失,所以测序结果是双峰。这种情况我建议你摇菌点单菌落,再提取单菌落再测序就没问题了。
5楼2023-04-27 16:55:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085801电气专硕272求调剂 +18 电气李 2026-04-13 20/1000 2026-04-15 12:54 by cq2548
[考研] 药学求调剂 +11 喽哈加油 2026-04-14 13/650 2026-04-14 21:14 by qingfeng258
[考研] 272分材料子求调剂 +41 Loy0361 2026-04-10 54/2700 2026-04-14 18:00 by lhj2009
[考研] 085500求调剂材料 +11 易11122 2026-04-09 11/550 2026-04-14 17:59 by lhj2009
[考研] 335求调剂 +19 想上岸呀!! 2026-04-12 21/1050 2026-04-14 16:23 by Art1977
[考研] 2026硕士调剂_能动_河南农业大学 +4 河南农业大学-能 2026-04-12 4/200 2026-04-13 22:01 by bljnqdcc
[考研] 一志愿西交机械专硕求调剂 +9 求上岸的小王 2026-04-10 9/450 2026-04-13 16:08 by jiangguiquan11
[考研] 297工科,求调剂? +13 河南农业大学-能 2026-04-12 13/650 2026-04-13 14:12 by dingyanbo1
[考研] 一志愿085802 323分求调剂 +13 drizzle_9 2026-04-12 14/700 2026-04-13 10:26 by Faiz5552
[考研] 求调剂 +16 张番茄不炒蛋 2026-04-10 17/850 2026-04-12 13:58 by 熬夜成!
[考研] 药学专硕调剂 +8 ? 一路生?花? 2026-04-10 10/500 2026-04-11 21:21 by zhouxiaoyu
[考研] 087100初试311求调剂 +4 任雅琴 2026-04-09 4/200 2026-04-11 10:33 by zhq0425
[考研] 275求调剂 +9 1624447980 2026-04-08 10/500 2026-04-11 10:20 by Delta2012
[考研] 0854调剂 +4 长弓傲 2026-04-09 4/200 2026-04-11 09:18 by 猪会飞
[考研] 调剂 +12 卷卷卷心菜_ 2026-04-09 13/650 2026-04-10 22:36 by Ftglcn90
[考研] 调剂 +19 小张ZA 2026-04-10 20/1000 2026-04-10 22:08 by 猪会飞
[考研] 0858求调剂 5+5 Gky09300550, 2026-04-10 8/400 2026-04-10 19:13 by chemisry
[考研] 344求调剂 +7 丶风雪夜归人丶 2026-04-09 7/350 2026-04-10 12:05 by pengliang8036
[考研] 本科211 工科085400 280分求调剂 可跨专业 +3 LZH(等待调剂中 2026-04-09 3/150 2026-04-09 21:29 by wutongshun
[考研] 286求调剂 +19 Faune 2026-04-08 20/1000 2026-04-09 08:36 by 哦哦123
信息提示
请填处理意见