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汕头大学海洋科学接受调剂
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erictan2046

铜虫 (正式写手)

[交流] 【求助】cDNA一直反转录不成功。

我用的是上海生工cDNA MMLV cDNA first cDNA strand, 反转录一直不成功。
我导师给我的意见是RNA出了问题,但最近RNA一直失败,有什么更好的办法提取RNA吗?或者有什么更好的试剂盒反转录的?

大家觉得需要买太贵的试剂盒或者反转录酶么???我这里实验室的有一个同学她是用 Invitrogen Trizol抽提试剂,她做出来了。
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

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小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
反转录很大程度上取决于你所提的RNA质量的好坏,纯度和浓度,试剂盒提比较干净,trizol提,仔细操作,特别需要注意RNA容易降解哦
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
4楼2009-09-28 11:18:47
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zdf68

新虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
Trizol Trizol抽提试剂
2楼2009-09-28 11:15:37
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wlwhappy

银虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
反转录酶挺贵的,我们组大部分都是自己定量的。
3楼2009-09-28 11:18:18
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
提RNA最经典的试剂就是trizol啊~这东西是常规试剂吧,难道你不用这个提?
MMLV本身就是很便宜的一个酶了,一两百块根几百块的质量其实没差多少,这种酶我一般让Invitrogen公司的代理送,因为平时跟他们买很多东西
世界上最好的逆转录酶是SuperScript III,Invitrogen公司的,实在做不出来就试试吧。
5楼2009-09-28 12:50:48
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