应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 5'RACE测序
81/1返回列表
查看: 724  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

zzhwish

铜虫 (初入文坛)

[交流] 5'RACE测序

各位达人：我做5‘race送往生物公司测序，怎么总是测出大肠杆菌的序列来呢。我是连接转化后，送的菌液测序，另外，转化后调单克隆，我一般调14个摇菌进行PCR验证，往往只有2个或三个有片段出现，这种情况能排除大肠杆菌污染的原因么？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-09-28 08:56:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaocy8903

木虫 (知名作家)
★ ★
zzhwish(金币+2,VIP+0): 10-16 12:54
两端有你的引物序列吗
有时候RACE会扩出一些莫名其妙的序列
赞一下(5人) 回复此楼
2楼2009-09-28 09:16:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zzhwish

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by zhaocy8903 at 2009-9-28 09:16:
两端有你的引物序列吗
有时候RACE会扩出一些莫名其妙的序列

在他们给我的结果里面 我只找到我下游引物，上游引物找不到呢。
赞一下 回复此楼
3楼2009-09-28 09:26:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zdf68

新虫 (正式写手)
★
zzhwish(金币+1,VIP+0): 10-16 12:54
不能排除大肠杆菌污染
赞一下(5人) 回复此楼
4楼2009-09-28 11:19:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zzhwish

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by zdf68 at 2009-9-28 11:19:
不能排除大肠杆菌污染

如果是大肠杆菌污染的话，那为什么我那菌液做PCR验证的时候，出现片段的只是少数呢？
赞一下 回复此楼
5楼2009-09-29 09:07:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

菊花茶

木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
amisking(金币+4,VIP+0): 9-30 08:27
zzhwish(金币+2,VIP+0): 10-16 12:54
原因可能：菌落挑的不单一，这样pcr也可能检测出目的片段；菌液污染了；测序刚好测到没连接上的
你送自己的引物去测

[ Last edited by 菊花茶 on 2009-9-29 at 10:22 ]
赞一下(14人) 回复此楼
6楼2009-09-29 10:21:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

speker

铁虫 (初入文坛)
★
zzhwish(金币+1,VIP+0): 10-16 12:54
有时是测序公司胡乱的送一个结果给你交差的。
赞一下(4人) 回复此楼
7楼2009-09-30 00:17:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

annwt

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by zzhwish at 2009-9-28 09:26:

在他们给我的结果里面 我只找到我下游引物，上游引物找不到呢。

测序的长度是600－800bp，如果你的序列比这个长度长，即便出现也不准。
赞一下 回复此楼
8楼2009-09-30 08:20:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zzhwish 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 BMTdnp4OJO9f 2026-11-06 4/200 2026-11-07 18:52 by Xc2FxHsHkBNc
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 BMTdnp4OJO9f 2026-11-06 5/250 2026-11-07 17:45 by Xc2FxHsHkBNc
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 2rKfVQg2jQww 2026-11-06 5/250 2026-11-07 17:34 by Xc2FxHsHkBNc
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 6/300 2026-11-07 15:44 by Xc2FxHsHkBNc
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 23/1150 2026-11-07 06:49 by Equinoxhua
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 5/250 2026-11-06 16:43 by 5sJFDKp2kwuI
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 14/700 2026-11-06 16:32 by 5sJFDKp2kwuI
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 11/550 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 14/700 2026-11-06 13:36 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 18/900 2026-11-06 13:36 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:11 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:10 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 kvewwGtKktqB 2026-11-04 16/800 2026-11-06 05:00 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 04:47 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 8/400 2026-11-06 02:24 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:15 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:02 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 hNpp4Y2CGvSC 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:53 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:42 by qL1cU46YIdK0
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-05 11:10 by PYZmcHr5kSaq
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭