| 查看: 534 | 回复: 4 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
| 【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 myn 的 6 个金币 ，回帖就立即获得 1 个金币，每人有 1 次机会 | |||
myn银虫 (小有名气)
|
[交流]
求助 内切酶
|
||
| 2类限制性核酸内切酶的的作用机理是什么？所含的金属离子起什么作用 |
回复此楼» 猜你喜欢
280分求调剂 一志愿085802
已经有6人回复
-
0854电子信息求调剂
已经有3人回复
-
263求调剂
已经有4人回复
-
石河子大学（211、双一流）硕博研究生长期招生公告
已经有3人回复
-
一志愿西安交通大学材料工程专业 282分求调剂
已经有13人回复
-
北科281学硕材料求调剂
已经有6人回复
-
328求调剂，英语六级551，有科研经历
已经有10人回复
-
298求调剂
已经有6人回复
-
310求调剂
已经有4人回复
-
311求调剂
已经有6人回复
★
myn(金币+1):谢谢参与
myn(金币+1):谢谢参与
| 顶一下 |
2楼2010-03-15 08:01:32
mxbeaver
木虫 (著名写手)
浪滔滔~人渺渺~
- 应助: 1 (幼儿园)
- 贵宾: 0.15
- 金币: 2949.4
- 红花: 2
- 帖子: 1064
- 在线: 104.7小时
- 虫号: 290818
- 注册: 2006-10-28
- 性别: MM
- 专业: 蛋白质组学
★
myn(金币+1):谢谢参与
myn(金币+1):谢谢参与
|
限制性酶主要分为三种类型：Ⅰ型限制酶为复合功能酶，具有限制-修饰两种功能，但在 DNA链上没有固定的切割位点，一般在离切割位点1kb到几kb的地方随机切割，不产生特异性片段。Ⅲ型酶与Ⅰ型酶基本相似，不同的是Ⅲ型酶有特异性的切割位点，但这两类酶对 DNA酶切分析的意义不大。 通常所说的限制性内切酶是指Ⅱ型酶，它能够识别与切割DNA链上的特定的核苷酸顺序，产生特异性的DNA片段。 限制性酶的识别序列，大部分具有双轴对称性结构或称回文序列。关于识别原理，参考：蛋白质对ＤＮＡ识别的模体中，除了锌指结构，螺旋－转角－螺旋，亮氨酸拉链和β带外，近年来发现，Ⅱ型限制性内切酶ＤＮＡ作用的模体有许多特别之处。通过对ＥｃｏＲＩ，ＢａｍＨＩ，ＥｃｏＲＶ等与ＤＮＡ复合物的空间构象，一级结构分析，发现酶分子存在催化性裂缝，并且氨基端形成臂结构包绕ＤＮＡ；同时ＤＮＡ发生构象变化，螺旋扭结。 限制性酶不但有特定的识别序列，并且任何一种酶切割 DNA链时，总是水解核苷酸3’和5’-磷酸二酯键的3’位磷酸酯键，使产物的5’端带磷酸单酯基团，而3’末端则为游离羟基。因此某一种酶的全部产物的末端具有相同的结构。 关于金属离子，它不是含在酶里面的，而是酶作用时所需的缓冲液里面的。它的作用也就是金属离子对于酶的作用：作为激活剂，提高酶活性。 激活剂作用包括两种情况: 一种是由于激活剂的存在, 使一些本来有活性的酶活性进一步提高, 这一类激活剂主要是离子或简单有机化合物. 另一种是激活酶原,无活性→有活性,这一类激活剂可能是离子或蛋白质. 1, 无机离子的激活作用 (1)金属离子:K+ ,Na+,Mg2+ ,Zn2+,Fe 2+ ,Ca2+ (2)阴离子:cl-,Br (3)氢离子 许多金属离子是酶的辅助因子,是酶的组成成分,参与催化反应中的电子传递. 有些金属离子可与酶分子肽链上侧链基团结合,稳定酶分子的活性构象. 有的金属离子通过生成螯合物,在酶与底物结合中起桥梁作用. 注意: (1) 无机离子的激活作用具有选择性,不同的离子激活不同的酶. (2) 不同离子之间有拮抗作用,如 Na+与 K+,Mg+与 Ca+,但 Mg+与 Zn+常可替代. (3) 激活剂的浓度要适中,过高往往有抑制作用,1~50mM 2, 简单有机分子的激活作用 ①还原剂(如 Cys,还原型谷胱甘肽)能激活某些活性中心含有—SH 的酶. ②金属螯合剂(EDTA)能去除酶中重金属离子,解除抑制作用. |
3楼2010-03-15 09:13:08
tracy007
木虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2562.9
- 散金: 216
- 红花: 3
- 帖子: 466
- 在线: 302小时
- 虫号: 793901
- 注册: 2009-06-14
- 专业: 环境经济学
4楼2010-03-15 10:34:27
hfztim
至尊木虫 (正式写手)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 24022.3
- 散金: 291
- 红花: 33
- 帖子: 783
- 在线: 95.9小时
- 虫号: 287965
- 注册: 2006-10-21
- 性别: MM
- 专业: 抗体工程学
5楼2010-03-15 10:46:49
