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melodyxin

铜虫 (小有名气)

[交流] 请教:蛋白诱导表达中出现的问题

做细菌的蛋白表达,不小心细菌长过了。OD600达到0.953,才加IPTG进行诱导表达,不知道这样还能成功表达,测出酶活吗?
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goodwish

木虫 (正式写手)

木虫书呆子

★ ★
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amisking(金币+1,VIP+0): 9-27 17:41
0.6到1.0都可以的。肯定没问题。
生命的海洋里,我是蓝色的一滴
2楼2009-09-27 15:33:35
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★
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amisking(金币+3,VIP+0): 9-27 17:41
肯定能表达了,1.0都做过,有没有活性就不一定了,即使没有活性也不一定是诱导时机的问题,影响因素很多的,比如IPTG浓度、诱导温度等。
3楼2009-09-27 15:34:49
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melodyxin

铜虫 (小有名气)

哦好的,明白了。谢谢各位!!!
4楼2009-09-27 15:38:14
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

★ ★ ★
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amisking(金币+2,VIP+0): 9-27 17:39
一点问题都没有哦,注意调节摇瓶的pH
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
5楼2009-09-27 17:21:16
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wlt728

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★
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amisking(金币+3,VIP+0): 9-27 17:39
我们是OD在0.8到1.2之间都可以的,你可以先测定一下菌的生长曲线,只要是在对数生长期内诱导就可以了。
I am not a hero , but I served with heroes!
6楼2009-09-27 17:36:42
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xiangao

金虫 (正式写手)


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我加了诱导剂后忘了放回摇床了,2个小时后又放进去的,有没有影响啊?
7楼2009-09-27 20:26:26
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wjswj

木虫 (正式写手)

小木虫领金币专业户


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影响肯定是有的,就是不好判定是积极的还是消极的,试了才知道。
金币是赌出来的
8楼2009-09-28 07:26:56
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kitty8682

金虫 (正式写手)

做过了,没问题的
9楼2009-09-28 09:47:54
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melodyxin

铜虫 (小有名气)

好的,谢谢。
10楼2009-09-28 23:04:36
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