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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请教：蛋白诱导表达中出现的问题
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melodyxin

铜虫 (小有名气)

[交流] 请教：蛋白诱导表达中出现的问题

做细菌的蛋白表达，不小心细菌长过了。OD600达到0.953，才加IPTG进行诱导表达，不知道这样还能成功表达，测出酶活吗？
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1楼 2009-09-27 15:02:59
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goodwish

木虫 (正式写手)

木虫书呆子
★ ★
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amisking(金币+1,VIP+0): 9-27 17:41
0.6到1.0都可以的。肯定没问题。
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生命的海洋里，我是蓝色的一滴
2楼2009-09-27 15:33:35
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★
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amisking(金币+3,VIP+0): 9-27 17:41
肯定能表达了，1.0都做过，有没有活性就不一定了，即使没有活性也不一定是诱导时机的问题，影响因素很多的，比如IPTG浓度、诱导温度等。
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3楼2009-09-27 15:34:49
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melodyxin

铜虫 (小有名气)
哦好的，明白了。谢谢各位！！！
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4楼2009-09-27 15:38:14
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者
★ ★ ★
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amisking(金币+2,VIP+0): 9-27 17:39
一点问题都没有哦，注意调节摇瓶的pH
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
5楼2009-09-27 17:21:16
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wlt728

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★
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amisking(金币+3,VIP+0): 9-27 17:39
我们是OD在0.8到1.2之间都可以的，你可以先测定一下菌的生长曲线，只要是在对数生长期内诱导就可以了。
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I am not a hero , but I served with heroes！
6楼2009-09-27 17:36:42
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xiangao

金虫 (正式写手)
★
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我加了诱导剂后忘了放回摇床了，2个小时后又放进去的，有没有影响啊？
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7楼2009-09-27 20:26:26
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wjswj

木虫 (正式写手)

小木虫领金币专业户
★
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影响肯定是有的，就是不好判定是积极的还是消极的，试了才知道。
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金币是赌出来的
8楼2009-09-28 07:26:56
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kitty8682

金虫 (正式写手)
做过了，没问题的
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9楼2009-09-28 09:47:54
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melodyxin

铜虫 (小有名气)
好的，谢谢。
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10楼2009-09-28 23:04:36
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