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陌上花~

新虫 (初入文坛)

[求助] 显影蛋白条带重复前浅后深

WB实验中,每块胶上两组重复,第一组出的条带较弱,第二组重复条带偏强,是什么原因呢?换了转膜夹子和滤纸也是如此?
谢谢
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十点零

新虫 (小有名气)

会不会是你样品还没有化完,或者没有充分混匀?还有就是两次加样的时候有没有注意枪头残留,SDS的上样缓冲液很容易挂壁的。

发自小木虫Android客户端
2楼2023-04-07 07:03:38
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陌上花~

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 十点零 at 2023-04-07 07:03:38
会不会是你样品还没有化完,或者没有充分混匀?还有就是两次加样的时候有没有注意枪头残留,SDS的上样缓冲液很容易挂壁的。

谢谢亲,样品化好了,12000rpm瞬离后取上清,之前制备样品变性之前是12000rpm,离心10min后取的上清进行的蛋白变性;
枪头残留的话,应该不太会,用的是去酶的枪头(质量会好一些),都是第二组重复上样蛋白条带强,不过亲说的,下次上样我会注意下。
亲,转膜的时候胶一直是横着放的,胶竖着转膜可以吗(湿转法),感谢
3楼2023-04-07 08:52:51
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