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汕头大学海洋科学接受调剂
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20022002db

[交流] 求助,关于质粒酶切

大家好,我之前构建了一系列质粒,送测序也都是对的,但是后来再重新提质粒怎么切也切不出来了,谁能帮我解释一下啊,谢谢了
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小瞥

铁虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
司马诸葛(金币+1,VIP+0): 9-25 14:59
首先确保你质粒的正确性
其次注意酶切体系,酶切时间
3楼2009-09-25 13:44:33
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xiaricha

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
质粒提的不好,重新提!
2楼2009-09-25 13:15:11
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nicole1124

新虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
司马诸葛(金币+2,VIP+0): 9-25 14:59
先看看是不是位点被甲基化了,再重新把质粒转化涂个板子,挑单克隆,重新做小抽,因为有时候小抽和中抽的过程中一些条件不对,会造成部分质粒变成很顽固的超螺旋,怎么切也切不开,我们实验室中抽的质粒有些就会遇到这种情况。用涂板子的方法纯化一下质粒就好了~
4楼2009-09-25 13:52:05
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