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[交流] 求助，关于质粒酶切

大家好，我之前构建了一系列质粒，送测序也都是对的，但是后来再重新提质粒怎么切也切不出来了，谁能帮我解释一下啊，谢谢了

1楼 2009-09-25 11:40:17

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银虫 (小有名气)

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质粒提的不好，重新提！

2楼2009-09-25 13:15:11

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铁虫 (小有名气)

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司马诸葛(金币+1,VIP+0): 9-25 14:59

首先确保你质粒的正确性
其次注意酶切体系，酶切时间

3楼2009-09-25 13:44:33

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新虫 (小有名气)

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司马诸葛(金币+2,VIP+0): 9-25 14:59

先看看是不是位点被甲基化了，再重新把质粒转化涂个板子，挑单克隆，重新做小抽，因为有时候小抽和中抽的过程中一些条件不对，会造成部分质粒变成很顽固的超螺旋，怎么切也切不开，我们实验室中抽的质粒有些就会遇到这种情况。用涂板子的方法纯化一下质粒就好了~

4楼2009-09-25 13:52:05

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