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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 色谱柱倒冲压力越来越大
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coconutyz

新虫 (小有名气)

[求助] 色谱柱倒冲压力越来越大 已有1人参与

柱子测样的时候压力突然变大，用纯甲醇和50%甲醇倒冲压力都未减小，正冲压力一直变大，怀疑是刚性颗粒进去了。
于是就用50%甲醇水一直倒冲，压力越来越大，现在大概倒冲压力变大了20Bar，请问这是正常的吗？

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1楼 2023-03-25 11:04:16
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珍珠爱吃鱼

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by coconutyz at 2023-03-27 13:35:36
主要是我们的样品在乙腈和甲醇中溶解度都很好，堵了以后已经用大比例甲醇倒冲了，没什么效果，用大比例水担心柱压过高了，所以改用的50%甲醇倒冲。我们的情况是柱子放在一台老仪器上走，在装柱子走样前用流动相、接 ...

对于常用的C18、C8柱等：
甲醇-水体系压力最高的比例差不多是50:50，我们从来不会用这个比例冲洗色谱柱，一般用10%或者20%甲醇水就可以。
流动相中如果有缓冲盐需要用高水相溶剂比如10%甲醇水先冲洗之后才能上高有机相，不然缓冲盐容易在色谱柱中析出。
如果你的流动相里面不含缓冲盐，可以尝试10%或者20%甲醇水低流速冲洗之后再切换成高比例有机相低流速冲洗，注意关注冲洗前后压力变化情况。
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coconutyz
6楼2023-03-27 15:17:26
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珍珠爱吃鱼

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
下次柱子前面加个保护柱吧，正用柱子堵了我们一般是低流速倒冲过夜
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2楼2023-03-25 16:47:00
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jiyannangxj

至尊木虫 (著名写手)

美女搞科研
50%甲醇水，这个比例正常柱压都是最大，也不知道你咋想的。如果你流动相里有缓冲盐，那就用20%甲醇水低流速慢冲，柱子里进刚性颗粒几乎不可能，除非你的样品溶解度极差，即便溶解度极差那也是样品析出不是刚性颗粒，用良性能与水互溶的溶剂冲冲就行了

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3楼2023-03-27 06:38:54
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coconutyz

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by jiyannangxj at 2023-03-27 06:38:54
50%甲醇水，这个比例正常柱压都是最大，也不知道你咋想的。如果你流动相里有缓冲盐，那就用20%甲醇水低流速慢冲，柱子里进刚性颗粒几乎不可能，除非你的样品溶解度极差，即便溶解度极差那也是样品析出不是刚性颗粒， ...

主要是我们的样品在乙腈和甲醇中溶解度都很好，堵了以后已经用大比例甲醇倒冲了，没什么效果，用大比例水担心柱压过高了，所以改用的50%甲醇倒冲。我们的情况是柱子放在一台老仪器上走，在装柱子走样前用流动相、接二通清洗了仪器管路，以为没事了，结果柱子上去，压力一开始还正常，然后突然变大，担心是否是仪器中的颗粒物进到柱子里。
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4楼2023-03-27 13:35:36
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