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coconutyz

新虫 (小有名气)

[求助] 色谱柱倒冲压力越来越大已有1人参与

柱子测样的时候压力突然变大,用纯甲醇和50%甲醇倒冲压力都未减小,正冲压力一直变大,怀疑是刚性颗粒进去了。
于是就用50%甲醇水一直倒冲,压力越来越大,现在大概倒冲压力变大了20Bar,请问这是正常的吗?

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珍珠爱吃鱼

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
下次柱子前面加个保护柱吧,正用柱子堵了我们一般是低流速倒冲过夜
2楼2023-03-25 16:47:00
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jiyannangxj

至尊木虫 (著名写手)

美女搞科研

50%甲醇水,这个比例正常柱压都是最大,也不知道你咋想的。如果你流动相里有缓冲盐,那就用20%甲醇水低流速慢冲,柱子里进刚性颗粒几乎不可能,除非你的样品溶解度极差,即便溶解度极差那也是样品析出不是刚性颗粒,用良性能与水互溶的溶剂冲冲就行了

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3楼2023-03-27 06:38:54
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coconutyz

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by jiyannangxj at 2023-03-27 06:38:54
50%甲醇水,这个比例正常柱压都是最大,也不知道你咋想的。如果你流动相里有缓冲盐,那就用20%甲醇水低流速慢冲,柱子里进刚性颗粒几乎不可能,除非你的样品溶解度极差,即便溶解度极差那也是样品析出不是刚性颗粒, ...

主要是我们的样品在乙腈和甲醇中溶解度都很好,堵了以后已经用大比例甲醇倒冲了,没什么效果,用大比例水担心柱压过高了,所以改用的50%甲醇倒冲。我们的情况是柱子放在一台老仪器上走,在装柱子走样前用流动相、接二通清洗了仪器管路,以为没事了,结果柱子上去,压力一开始还正常,然后突然变大,担心是否是仪器中的颗粒物进到柱子里。
4楼2023-03-27 13:35:36
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coconutyz

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 珍珠爱吃鱼 at 2023-03-25 16:47:00
下次柱子前面加个保护柱吧,正用柱子堵了我们一般是低流速倒冲过夜

嗯嗯 谢谢提醒
5楼2023-03-27 13:36:39
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珍珠爱吃鱼

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by coconutyz at 2023-03-27 13:35:36
主要是我们的样品在乙腈和甲醇中溶解度都很好,堵了以后已经用大比例甲醇倒冲了,没什么效果,用大比例水担心柱压过高了,所以改用的50%甲醇倒冲。我们的情况是柱子放在一台老仪器上走,在装柱子走样前用流动相、接 ...

对于常用的C18、C8柱等:
甲醇-水体系压力最高的比例差不多是50:50,我们从来不会用这个比例冲洗色谱柱,一般用10%或者20%甲醇水就可以。
流动相中如果有缓冲盐需要用高水相溶剂比如10%甲醇水先冲洗之后才能上高有机相,不然缓冲盐容易在色谱柱中析出。
如果你的流动相里面不含缓冲盐,可以尝试10%或者20%甲醇水低流速冲洗之后再切换成高比例有机相低流速冲洗,注意关注冲洗前后压力变化情况。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

6楼2023-03-27 15:17:26
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coconutyz

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by 珍珠爱吃鱼 at 2023-03-27 15:17:26
对于常用的C18、C8柱等:
甲醇-水体系压力最高的比例差不多是50:50,我们从来不会用这个比例冲洗色谱柱,一般用10%或者20%甲醇水就可以。
流动相中如果有缓冲盐需要用高水相溶剂比如10%甲醇水先冲洗之后才能上高 ...

好的,谢谢!已经换成大比例水低速冲了,感谢!
7楼2023-03-27 17:13:52
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