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茚三酮显色测氨基酸含量已有20人参与
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最近在做茚三酮测氨基酸含量实验，在做标准曲线时，连做了三次，发现每次结果都不一样，而且吸光度也不是线性（显色后颜色和浓度也不成比例）。我用亮氨酸做的，浓度梯度为0.06---0.3umol/ml. 茚三酮试剂（1g茚三酮溶于50ml95%乙醇），缓冲液用的pH5.4的2M醋酸缓冲液。反应时加标准液后，再加1ml缓冲液，1ml茚三酮，水浴15min,冷却静置5min后，加3ml60%乙醇，570nm比色。结果显色后有的没变色（仍为黄色），有的为蓝色，但是颜色和浓度不成比例。不知道哪出的问题？恳请各位做过相关实验的给点指导意见，谢谢了！ [ Last edited by 350784478 on 2009-9-25 at 10:51 ] |
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