24小时热门版块排行榜    

查看: 1385  |  回复: 5
当前主题已经存档。
【有奖交流】积极回复本帖子,参与交流,就有机会分得作者 kwkw 的 7 个金币 ,回帖就立即获得 1 个金币,每人有 1 次机会

kwkw

木虫 (著名写手)

[交流] ISSR-PCR?

有人做ISSR-PCR出过吗?我看ISSR好像都扩出10-20条带,可我最好的时候只扩出8、9条带,而现在只出一条带还只有200bp左右,谁出现过这种情况,如何解决的?我用同一引物扩不同的样品(同种),用不同引物(ISSR)扩同一样品,四个产物差不了10bp,但还是不一样大的,问一下高手,这是什么原因?我应该改一下哪个因素?那个梯度PCR仪有一个封片断了一点,密封性差一点会影响实验结果吗?
回复此楼
再苦:也别忘记坚持!再烦:也别忘记微笑!再急:也要注意语气!再累:也要爱自己!低调做人,你会一次比一次稳健。高调做事,你会一次比一次优秀!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

695

木虫 (职业作家)


kwkw(金币+1):谢谢参与
正常了吧,材料不一样,结果也会不一样,统计标准不一样,结果也不一样的,只要结果差不多就行了,我当时AFLP也遇到过这样的问题
2楼2009-09-23 22:12:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kwkw

木虫 (著名写手)

不是,我现在还在做预实验,一条ISSR引物就扩出一条带,这应该是不正常的。我想知道这是什么原因?别人做都是特异性差,我这特异性也太强了吧?
再苦:也别忘记坚持!再烦:也别忘记微笑!再急:也要注意语气!再累:也要爱自己!低调做人,你会一次比一次稳健。高调做事,你会一次比一次优秀!
3楼2009-09-24 07:48:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zxhong

金虫 (正式写手)


kwkw(金币+1):谢谢参与
lz能否帮忙列一下ISSR所用药品,并麻烦告知作ISSR的目的是?
4楼2009-09-24 08:39:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kwkw

木虫 (著名写手)

PCR反应体系:10×buffer  TAQ酶 dNTP 单引物  总DNA .目的是用微卫星重复序列作为引物来扩增两个微卫星之间的序列,研究生物的遗传多样性
再苦:也别忘记坚持!再烦:也别忘记微笑!再急:也要注意语气!再累:也要爱自己!低调做人,你会一次比一次稳健。高调做事,你会一次比一次优秀!
5楼2009-09-24 17:12:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

louyiceng

荣誉版主 (知名作家)

优秀版主


kwkw(金币+1):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by kwkw at 2009-09-24 17:12:38:
PCR反应体系:10×buffer  TAQ酶 dNTP 单引物  总DNA .目的是用微卫星重复序列作为引物来扩增两个微卫星之间的序列,研究生物的遗传多样性

谢谢
6楼2010-03-15 07:55:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

eesing

金虫 (正式写手)


kwkw(金币+1):谢谢参与
引用回帖:
1楼: Originally posted by kwkw at 2009-09-23 21:45:23:
有人做ISSR-PCR出过吗?我看ISSR好像都扩出10-20条带,可我最好的时候只扩出8、9条带,而现在只出一条带还只有200bp左右,谁出现过这种情况,如何解决的?我用同一引物扩不同的样品(同种),用不同引物(ISSR)扩同一 ...

现在楼主做出来了吗?我也在做发现同一次三个一样的pcr体系,扩增出来结果有显著差异,不知lz有一样的情况吗?如何解决的呢?还有就是背景有点亮,像是抹带,望指点,谢谢
7楼2011-08-17 07:45:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 kwkw 的主题更新
提示: 如果您在30分钟内回复过其他散金贴,则可能无法领取此贴金币
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +5 zju2000 2026-08-16 5/250 2026-08-16 23:23 by Haru815
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +32 医学老男孩 2026-08-13 74/3700 2026-08-16 21:05 by 医学老男孩
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +11 家与远方 2026-08-10 16/800 2026-08-16 10:28 by ray43
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +10 majunge000 2026-08-11 12/600 2026-08-16 08:18 by xli1984
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +6 wangze12014 2026-08-14 7/350 2026-08-15 20:12 by gltch
[基金申请] filecode +8 cratir 2026-08-14 12/600 2026-08-15 18:08 by zyfgau
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +12 Tide man 2026-08-10 13/650 2026-08-15 16:34 by 氺木
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
信息提示
请填处理意见