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wwtp

铜虫 (小有名气)

[交流] 求细胞裂解液的配制方法

细胞裂解液中的SDS是什么东西啊?配制方法有国标吗?能不能把标准发过来看看,谢谢了。

[ Last edited by wwtp on 2009-10-13 at 09:43 ]
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zier1011

木虫 (著名写手)

SDS:蛋白变性剂
SDS是阴离子去污剂,作为变性剂和助溶试剂,它能断裂分子内和分子间的氢键,使分子去折叠,破坏蛋白分子的二。三级结构。而强还原剂如巯基乙醇,二硫苏糖醇能使绊胱氨酸残基间的二硫键断裂。在样品和凝胶中加入还原剂和SDS后,分子被解聚成多肽链,解聚后的氨基酸侧链和SDS结合成蛋白- SDS胶束,所带的负电荷大大超过了蛋白原有的蛋白量,这样就消除了不同分子间的电荷差异和结构差异。
SDS-PAGE一般采用的是不连续缓冲系统,于连续缓冲系统相比,能够有较高的分辨率。
花还香香的
12楼2009-10-15 11:22:15
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zc450zc

金虫 (正式写手)

你可以上网上的仪器网站查下啊
2楼2009-09-22 17:21:02
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wwtp

铜虫 (小有名气)

有懂的朋友出来帮下忙吧
3楼2009-10-13 09:56:49
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wwtp

铜虫 (小有名气)


sxdxrhyy(金币+1,VIP+0):xiexie 10-13 12:48
1.1M Tris 溶液的配置

取Tris242.2g,加ddH2O至1600ml,加热溶解。
2.1M Tris-HCL Ph=8.0溶液的配置  

取 1M Tris 溶液160ml用分析纯盐酸调至Ph=8.0(需浓盐酸约8.5ml),加ddH2O定容至200ml,高压灭菌备用。
3. 0.5M EDTA溶液的配置

称EDTA-Na2 37.2g 先用140ml ddH2O溶解,加入14ml NaOH(10M)使EDTA-Na2溶解,再用NaOH(10M)溶液调至Ph=8.0,加ddH2O定容至200ml,高压灭菌备用。
4. 细胞裂解液的配制

称15gCTAB(Hexadecyltrimethylammonium bromide)(先用约600ml ddH2O加热溶解)放入烧杯中,加入75ml 1M Tris-HCL(Ph=8.0),58.5g NaCL(先用少量ddH2O溶解),30ml 0.5M EDTA,定容至1000ml,混合均匀备用。
4楼2009-10-13 10:03:34
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