| 查看: 391 | 回复: 0 | |||
| 【悬赏金币】回答本帖问题，作者Vath将赠送您 20 个金币 | |||
[求助]
蛋白偶联荧光素后浓度测定
|
|||
|
最近纯化蛋白然后在测定浓度方面遇到一些问题，所以来求助大家！ 1.单体和二倍体混合物的浓度如何确定（蛋白形成了dimer），然后还原成单体后会不会出现浓度变高的情况？———我的目的蛋白他的单体和dimer的消光系数是一样的； 2.蛋白/抗体偶联荧光基团之后应该如何测定浓度，像是偶联AF 488/568这些荧光基团-我用microdrop测的图在下面——我总共只用了60ug蛋白，不考虑脱盐浓缩损耗掉的，最后测反而含量增加了——我使用的蛋白是单体和dimer混合物，但是在偶联之前加入了工作浓度为10mM的TCEP打开双建； 3.偶联荧光基团后的抗体/蛋白应该怎么保存——有的说不能-20℃，荧光会淬灭——但是很多在售的荧光蛋白都是-20℃保存的； 4.关于3 K filter（Millipore）的问题：使用3K浓缩置换20kd左右大小的蛋白，然后浓缩后取flow through和浓缩液做ELisa，发现流穿也有活性，也还有蛋白？可是20kD左右的是如何穿过3k的膜的？不管是新投入使用的filter还是用过一次的都一样； 🤦♂️@hc-material@gyesang |
回复此楼» 猜你喜欢
277求调剂
已经有3人回复
-
求调剂
已经有5人回复
-
材料与化工085600调剂求老师收留
已经有6人回复
-
化工学硕306求调剂
已经有3人回复
-
085701环境工程专硕求调剂
已经有7人回复
-
伙伴们，祝我生日快乐吧
已经有6人回复
-
（081700）化学工程与技术-298分求调剂
已经有8人回复
-
302求调剂
已经有3人回复
-
271求调剂
已经有6人回复
-
290求调剂
已经有5人回复
