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yanglinhui

铜虫 (小有名气)

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[交流] 苯酚氯仿异戊醇，无水乙醇沉淀DNA 效率很低怎么办

很急，请各位高手指教

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1楼 2009-09-22 10:05:33

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

charon1982

铁杆木虫 (著名写手)

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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

我帮你回答一下吧
首先考虑你的菌的革兰氏阴性还是阳性？
我做阳性菌的，以前提的时候几乎提不出来，后来加入大量溶菌酶，然后过夜处理，解决这一问题。
其次如果TRIS饱和酚，已经氧化了，提DNA 也提不出来，我也遇到过。
第三乙醇这一步一般不会出问题，用冰的无水乙醇会提高你的沉淀效率，有一种情况是已经溶解的DNA，再沉淀时会沉淀不下来，需要调整盐浓度