应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » IPTG诱导后直接-20℃冰冻 第二天融化后超声破碎 这样对蛋白活性有没有影响？
71/1返回列表
查看: 1436  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

luckydog52

木虫 (著名写手)

[交流] IPTG诱导后直接-20℃冰冻 第二天融化后超声破碎 这样对蛋白活性有没有影响？

IPTG诱导5h之后直接放在了-20摄氏度冰箱里
第二天融化后破碎，对蛋白表达 和活性有影响吗？

超声破碎条件是 3s/3s  80循环  5次  40分钟 大肠杆菌这样破碎行不行？

[ Last edited by luckydog52 on 2009-9-21 at 17:49 ]
回复此楼

» 猜你喜欢
自信源于一次次成功的积累
1楼 2009-09-21 17:00:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

paulajjh

木虫 (著名写手)
我感觉没有影响
回复此楼
2楼2009-09-21 17:17:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

黑罕

金虫 (小有名气)
不会，反而对破碎更有利
超声破碎条件  间隔时间可以长些
另外，多少次多少时间视破碎情况而定
总之，要菌液澄清不粘连即可
赞一下 回复此楼
3楼2009-09-21 18:57:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

goodwish

木虫 (正式写手)

木虫书呆子
★
luckydog52(金币+1,VIP+0): 9-22 09:26
应该没有影响。最好是离心后只把菌体沉淀冻存。
赞一下(1人) 回复此楼
生命的海洋里，我是蓝色的一滴
4楼2009-09-22 00:04:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mascotte

金虫 (正式写手)
★ ★
luckydog52(金币+2,VIP+0): 9-22 09:22
菌体破碎的方法比较多，反复冻融破碎和超声破碎都比较常用，冻融一般推荐急冻（液氮），超声的功率不要太大，我一般用50-100w，间隔时间长是为了保证温度不过高的，建议冰水浴超声，但是各种破碎的操作都需要视情况加入蛋白酶抑制剂 PMSF等
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2009-09-22 03:45:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者
这个嘛，要离心去除发酵液，提前分装好后放入-20℃冰箱，
一般没有影响的，
赞一下 回复此楼
【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
6楼2009-09-22 10:40:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

muchong5577

金虫 (正式写手)
★ ★
luckydog52(金币+2,VIP+0): 9-23 22:57
没有影响，我-20放了一个星期呢。
赞一下 回复此楼
7楼2009-09-22 12:49:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 luckydog52 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 国自然面上和省基金B类撒花 +7 花田半亩～白 2026-04-21 7/350 2026-04-22 14:33 by 后起之秀66
[考博] 华师大读博 +3 xq83 2026-04-22 5/250 2026-04-22 10:42 by xq83
[教师之家] 又一批高校组建人工智能学院 师资行吗 不是骗人吗 +5 yexuqing 2026-04-19 5/250 2026-04-22 10:01 by easeheart
[考研] 0854求调剂 +24 门路摸摸 2026-04-15 28/1400 2026-04-22 09:54 by Sy199704！
[论文投稿] 急需审稿人！！！ +3 陆小果画大饼 2026-04-21 3/150 2026-04-21 23:54 by jzy_123456
[考博] 申博/考博 +4 啃面包的小书虫 2026-04-17 8/400 2026-04-21 16:26 by 啃面包的小书虫
[考研] 295分求调剂 +6 ?要上岸? 2026-04-17 6/300 2026-04-21 08:18 by Equinoxhua
[考研] 一志愿中科大材料与化工，353分还有调剂学校吗 +11 否极泰来2026 2026-04-15 13/650 2026-04-20 22:31 by Equinoxhua
[考研] 085600材料与化工调剂 5+3 孜孜不倦2002 2026-04-19 6/300 2026-04-20 21:25 by babero
[论文投稿] 期刊推荐 +3 材料研究生 2026-04-15 5/250 2026-04-20 16:02 by 豆豆7758
[论文投稿] 有没有接收比较快的sci期刊呀，最好在一个月之内的，研三孩子求毕业 20+4 之护着 2026-04-16 7/350 2026-04-20 15:45 by 豆豆7758
[考博] 湖南大学刘巧玲课题组2026年第二批次博士研究生招生信息 +3 南风观火 2026-04-18 5/250 2026-04-20 10:13 by 南风观火
[考研] 求计算机方向调剂 +3 Toffee2 2026-04-16 6/300 2026-04-19 22:37 by ll叶
[考研] 294求调剂 +8 淡然654321 2026-04-17 9/450 2026-04-19 19:51 by Equinoxhua
[考研] 304求调剂 +8 castLight 2026-04-16 8/400 2026-04-19 17:14 by 中豫男
[考研] 求调剂 +10 小聂爱学习 2026-04-16 12/600 2026-04-19 16:51 by 中豫男
[考研] 接受任何调剂 +6 也就是栗子 2026-04-17 7/350 2026-04-18 17:20 by 涵竹刘
[考研] 收到复试调剂但是去不了 +8 小蜗牛* 2026-04-16 8/400 2026-04-18 11:15 by zixin2025
[考研] 急需调剂 +9 绝不放弃22 2026-04-15 10/500 2026-04-18 08:09 by chixmc
[考研] 322求调剂 +6 tekuzu 2026-04-17 6/300 2026-04-17 13:48 by Espannnnnol
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭