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汕头大学海洋科学接受调剂
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huangdi07

铁杆木虫 (小有名气)

[交流] pcr产物加A后用不用纯化后再连T载体啊

最近在做t-a连接,转化感受态细胞后总是不长斑,怀疑是加A后没有纯化造成的,我用的是全式金的t载体,想听听大家的意见
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huangdi07

铁杆木虫 (小有名气)

你们一边用什么样的加A体系啊   长出的白斑一般有多少啊
4楼2009-09-19 19:52:09
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)

★ ★ ★
amisking(金币+2,VIP+0): 9-19 19:45
huangdi07(金币+1,VIP+0): 9-19 19:50
加A后纯化是最好的,当然不出话也行,TA克隆完全可以长的出来。TA克隆是很好长的,如果你一个都没长出来的话,是不是的你的抗性搞错了?
2楼2009-09-19 18:53:35
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cato8163

银虫 (正式写手)


huangdi07(金币+1,VIP+0): 9-19 19:50
2楼说的有道理。
一般很好连的。
3楼2009-09-19 19:22:11
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by huangdi07 at 2009-9-19 19:52:
你们一边用什么样的加A体系啊   长出的白斑一般有多少啊

体系和正常PCR的是一样的,不加引物和模板而已,引物和模板的体积用dd水补。
5楼2009-09-19 21:18:47
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