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彤彤0122

金虫 (小有名气)

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[交流] 如何测定表达的酶量及活力

求教各位大大
我在一个重组菌中表达一种酶，我想测它表达的合不合我要求
应该用什么方法？
比如酶量测定，酶活测定，比活测定等
详细一点说明，谢谢。。

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1楼 2009-09-19 14:22:30

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qingjunlei

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350784478(金币+2,VIP+0):谢谢参与 9-20 11:52

那就要看你表达需要纯化与浓缩不啊
一般需要过柱纯化后浓缩，用SDS-PAGE定量
用国家标准的酪素测定活力
其他活性测定应该参照酶的具体性质而定

赞一下(11人)

3楼2009-09-19 16:13:40

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查看全部 6 个回答

gastrodia

金虫 (正式写手)

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你是什么酶啊？你的要求是啥？你表述的都不明不白，别人怎么解答你的疑问啊？

2楼2009-09-19 16:08:41

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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)

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专业: 微生物生理与生物化学

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你如果想看看有没有酶活，可以先破碎细胞提取粗酶液，测其酶活（方法要看你要测什么酶），如果与对照相比酶活提高明显那就表达了啊！如果差距不明显的话，可以再纯化了再测酶活。

赞一下(11人)

4楼2009-09-19 16:22:53

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彤彤0122

金虫 (小有名气)

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性别: MM
专业: 生物化学

谢谢楼上几位，还有问题就是比活怎么测？还有KM值怎么算？谢谢。。

5楼2009-09-20 11:41:36

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