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彤彤0122

金虫 (小有名气)

[交流] 如何测定表达的酶量及活力

求教各位大大
我在一个重组菌中表达一种酶,我想测它表达的合不合我要求
应该用什么方法?
比如酶量测定,酶活测定,比活测定等
详细一点说明,谢谢。。
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qingjunlei

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小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
350784478(金币+2,VIP+0):谢谢参与 9-20 11:52
那就要看你表达需要纯化与浓缩不啊
一般需要过柱纯化后浓缩,用SDS-PAGE定量
用国家标准的酪素测定活力
其他活性测定应该参照酶的具体性质而定
3楼2009-09-19 16:13:40
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gastrodia

金虫 (正式写手)

你是什么酶啊?你的要求是啥?你表述的都不明不白,别人怎么解答你的疑问啊?
2楼2009-09-19 16:08:41
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
350784478(金币+2,VIP+0):感谢参与 9-20 11:52
你如果想看看有没有酶活,可以先破碎细胞提取粗酶液,测其酶活(方法要看你要测什么酶),如果与对照相比酶活提高明显那就表达了啊!如果差距不明显的话,可以再纯化了再测酶活。
4楼2009-09-19 16:22:53
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彤彤0122

金虫 (小有名气)

谢谢楼上几位,还有问题就是比活怎么测?还有KM值怎么算?谢谢。。
5楼2009-09-20 11:41:36
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