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酶活与孵育时间
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最近在做酶的体外孵育试验，在蛋白仅仅与缓冲液共孵育的情况下，酶活会随着时间而上升，但是当加入了NADPH而，这种现在就没有了。 请问酶的孵育时间与酶活，或是在NADPH参与的情况下，这种现象该怎么解释？ 实验分2租 1 蛋白+缓冲液（Tris-HCL/EDTA ph7.4）37度 孵育40分钟，每10分钟取一定量测定酶活 2 蛋白+缓冲液（Tris-HCL/EDTA ph7.4）+NADPH 37度 孵育40分钟，每10分钟取一定量测定酶活 结果如图： |
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CYP450酶，测定CYP1A活性（EROD） EROD方法参照 Krijgsheld, K.R., Gram, T.E., 1984. Selective induction of renal microsomal cytochrome P450-linked monooxygenases by 1,1-dichloroethylene in mice. Biochem. Pharmacol. 33,1951-1956. 孵育方法参照 Renee D.Induction and Post-Transcriptional Suppression of Hepatic Cytochrome P450 1Al by 3,3’,4,4’-Tetrachlorobiphenyl Biochemical Pharmacology, Vol. 53, pp. 1029-1040, 1997. 方法都是以前用过的，没什么问题的 |
7楼2009-09-18 23:50:26
2楼2009-09-18 09:55:20
3楼2009-09-18 09:55:53
zhuangyu8188
铁虫 (小有名气)
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4楼2009-09-18 11:00:36