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nick.nye-0313铜虫 (小有名气)
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[交流]
求助,有玻璃珠提DNA经验的请帮帮忙!谢谢!
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一般动物组织提DNA方法不用常规方法,有没有更简单的方法,不用蛋白酶消化的! 还有,有没有大虾用玻璃珠提DNA比较有经验的!可否讲讲实验过程应该注意什么问题! 谢谢! |
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l_inhumain
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2楼2009-09-17 16:57:28
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nick.nye-0313
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charlies929
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l_inhumain
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1. 收集菌液,用TE Buffer洗一两遍 2. 用200 uL TE Buffer 重悬菌体 3. 加50mg 玻璃珠,加入100ul 酚氯仿 4. 剧烈震荡 1-2min 5. 离心12000rpm,5min 6.转以上清(160ul)至新管 7.补加40ulTE Buffer,加200ul 酚氯仿 8. 抽提离心12000rpm,5min 9.转以上清后,用RNase消化一下 后面再抽提一下就可以了。 做PCR一点问题都没有 我们买的玻璃珠就直接用的,震荡是用的那种重悬细胞的仪器,振起来非常剧烈。 |
6楼2009-09-18 22:42:32
qqsvery
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