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fgwx

金虫 (正式写手)

[交流] PCR温度(请教)

5’ primer:的GC含量是45.5%,Tm值是61.1℃    22bp
3’ primer: 的GC含量是 36%, Tm值是 55.6℃  25bp

PCR退火温度应该设多少呢?是根据什么来的啊?谢谢了
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Charlie1331

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
这个也和你用什么酶有关系的……
4楼2009-09-17 09:30:01
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查看全部 18 个回答

雨雪霏霏9992

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+1,VIP+0): 9-17 22:12
你可以做个梯度PCR测试一下,这样得到的比较准确
2楼2009-09-17 08:25:56
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+1,VIP+0): 9-17 22:12
你用引物合成单上面50mM Na+的Tm值加5度以上即可
3楼2009-09-17 09:00:46
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dingyanhua

铜虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你可以做个梯度啊!检测一下哪个温度最合适!你可以做从54度到67度的梯度
5楼2009-09-17 09:55:49
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