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000zgh000

新虫 (小有名气)

[交流] 求助“帮忙看看这是怎么回事”

我想用miRNA进行基因治疗,前些天在cell上发表了一篇文章,用AAV表达miRNA-26a-2治疗肝癌,在包装miRNA-26a-2基因时,他 设计的引物是miR-26a-2.NheI/NotI  amplification
Forward primer sequence (5'-3')
CCGCCGGCTAGCCGGCAGGGTGTCTGTCTAGT  
Reverse primer sequence (5'-3')
AAGGAAAAAAGCGGCCGCCAGGCTTCCAATGGATCAGT
P出来大约200bp,请高手指点一下,他的引物是怎么设计的啊?miRNA-26a-2成熟序列是:14| 5'- UUCAAGUAAUCCAGGAUAGGC -3' |34   其基因定位在chromosome: 12; Location: 12q14.1,急用,非常感激!!!!
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

随便设计,只要扩出包含stem-loop的基因组即可
2楼2009-09-17 09:03:22
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
re楼主,基因结构为:
侧翼-茎环-侧翼

模板可以为DNA或者RNA

无需把miR的全长基因扩出,加工的酶以识别结构为主而非序列
3楼2009-09-17 14:14:14
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