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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助“帮忙看看这是怎么回事”
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000zgh000

新虫 (小有名气)

[交流] 求助“帮忙看看这是怎么回事”

我想用miRNA进行基因治疗，前些天在cell上发表了一篇文章，用AAV表达miRNA-26a-2治疗肝癌，在包装miRNA-26a-2基因时，他 设计的引物是miR-26a-2.NheI/NotI  amplification
Forward primer sequence (5'-3')
CCGCCGGCTAGCCGGCAGGGTGTCTGTCTAGT  
Reverse primer sequence (5'-3')
AAGGAAAAAAGCGGCCGCCAGGCTTCCAATGGATCAGT
P出来大约200bp，请高手指点一下，他的引物是怎么设计的啊？miRNA-26a-2成熟序列是：14| 5'- UUCAAGUAAUCCAGGAUAGGC -3' |34   其基因定位在chromosome: 12; Location: 12q14.1，急用，非常感激！！！！
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1楼 2009-09-16 22:16:38
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
随便设计，只要扩出包含stem-loop的基因组即可
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2楼2009-09-17 09:03:22
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
re楼主，基因结构为：
侧翼-茎环-侧翼

模板可以为DNA或者RNA

无需把miR的全长基因扩出，加工的酶以识别结构为主而非序列
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2009-09-17 14:14:14
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