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dummy’eye

新虫 (小有名气)

[交流] 求助 已有2人参与

有人做过用重叠延伸pcr连接两段基因吗？我的两基因重叠pcr后，目的条带很亮，还没什么杂带。我胶回收后，再用两段引物扩增，怎么都扩不出来了

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1楼 2022-12-11 18:58:07
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澜沧的爱

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
两基因拼接的时候，减少一下循环数试试，20个循环基本就可以了。循环越多，可能发生的错配越多。诺唯赞的phant高保真酶还可以，我之前拼接也是用它

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8楼2023-02-01 11:56:44
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shuaibia6

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可以先尝试测序，看看是不是你想要的目的条带
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2楼2022-12-12 09:03:22
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dummy’eye

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by shuaibia6 at 2022-12-12 09:03:22
可以先尝试测序，看看是不是你想要的目的条带

测了序，连是连上了，但是有一堆突变

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3楼2023-01-10 15:27:06
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dummy’eye

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by dummy’eye at 2023-01-10 15:27:06
测了序，连是连上了，但是有一堆突变
...

用的还是高保真酶，诺唯赞的

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4楼2023-01-10 15:28:49
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