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墨绿酷酷哒

新虫 (初入文坛)


[交流] 放线菌菌落pcr技术

有没有做过放线菌菌落pcr的大佬呀,我们做的效率好低呀,有没有什么好用的方法?真的是各种条件各种方法试了,还是不行,因为我们的量比较大所以提取dna的方法不太可取,想采用菌落pcr,可是结果不是很好,救救孩子吧!!!
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
放线菌是有菌丝的,大多数放线菌液体培养会有菌球或者絮状菌体,楼主如何能以菌体为模板扩增?如果是菌落,那么由于放线菌的细胞壁比革兰氏阴性菌硬,也不好破胞。我也想知道有何良策。
9楼2022-11-23 01:32:18
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WSW_Alone

木虫 (著名写手)



墨绿酷酷哒(金币+1): 谢谢参与
溶菌酶用了吗

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3楼2022-11-12 09:33:02
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墨绿酷酷哒

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
3楼: Originally posted by WSW_Alone at 2022-11-12 09:33:02
溶菌酶用了吗

没有,我们用的体系是12.5微升的Taq E+9.5水+1DNA模板+1DMSO+1通用引物,能不能详细说一下,怎么做,谢谢!!
7楼2022-11-14 16:03:52
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WSW_Alone

木虫 (著名写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by 墨绿酷酷哒 at 2022-11-14 16:03:52
没有,我们用的体系是12.5微升的Taq E+9.5水+1DNA模板+1DMSO+1通用引物,能不能详细说一下,怎么做,谢谢!!...

你可以参考一下天根细菌基因组DNA提取试剂盒的建议
https://www.tiangen.com/upload/f ... 826095238_36207.pdf
8楼2022-11-19 23:03:13
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tzynew2楼
2022-11-11 22:58   回复  
墨绿酷酷哒(金币+1): 谢谢参与
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XG-WUST5楼
2022-11-12 22:36   回复  
墨绿酷酷哒(金币+1): 谢谢参与
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