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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 分类/鉴定 » 放线菌菌落pcr技术
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墨绿酷酷哒

新虫 (初入文坛)

[交流] 放线菌菌落pcr技术

有没有做过放线菌菌落pcr的大佬呀，我们做的效率好低呀，有没有什么好用的方法？真的是各种条件各种方法试了，还是不行，因为我们的量比较大所以提取dna的方法不太可取，想采用菌落pcr，可是结果不是很好，救救孩子吧！！！
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1楼2022-11-11 22:56:48
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WSW_Alone

木虫 (著名写手)
★
墨绿酷酷哒(金币+1): 谢谢参与
溶菌酶用了吗

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3楼2022-11-12 09:33:02
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墨绿酷酷哒

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by WSW_Alone at 2022-11-12 09:33:02
溶菌酶用了吗

没有，我们用的体系是12.5微升的Taq E+9.5水+1DNA模板+1DMSO+1通用引物，能不能详细说一下，怎么做，谢谢!!
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7楼2022-11-14 16:03:52
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WSW_Alone

木虫 (著名写手)
★
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引用回帖:
7楼: Originally posted by 墨绿酷酷哒 at 2022-11-14 16:03:52
没有，我们用的体系是12.5微升的Taq E+9.5水+1DNA模板+1DMSO+1通用引物，能不能详细说一下，怎么做，谢谢!!...

你可以参考一下天根细菌基因组DNA提取试剂盒的建议
https://www.tiangen.com/upload/f ... 826095238_36207.pdf
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8楼2022-11-19 23:03:13
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
放线菌是有菌丝的，大多数放线菌液体培养会有菌球或者絮状菌体，楼主如何能以菌体为模板扩增？如果是菌落，那么由于放线菌的细胞壁比革兰氏阴性菌硬，也不好破胞。我也想知道有何良策。
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9楼2022-11-23 01:32:18
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fenggou82

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
加点DMSO,煮一下

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10楼2023-04-03 23:06:37
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tzynew2楼
2022-11-11 22:58   回复  
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miaojiabing4楼
2022-11-12 18:41   回复  
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XG-WUST5楼
2022-11-12 22:36   回复  
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假大空6楼
2022-11-13 08:37   回复  
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