应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 网络生活区 » 有奖问答 » 实验讨论 » DEAE纯化蛋白
162/2返回列表上一页12
查看: 4403  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【悬赏金币】回答本帖问题，作者rzrzbs将赠送您 13 个金币
本帖产生 1 个 博学EPI ，点击这里进行查看

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

如果不是酶，就不能通过测定酶活力的方式来判断有无目标蛋白质。你说你的目标蛋白质不是酶，那你判断样品中有没有你的目标蛋白质的标准是“SDS-PAGE所得结果，泳道中在预计分子量位置有条带”是吗？如果是这样，会不会存在你的预计大小处有别的蛋白质也存在干扰的可能？或者说你的目标蛋白质在所有谷物栽培种中都是很大很大一坨？
赞一下 回复此楼
流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
11楼2022-11-16 10:31:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rzrzbs

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2022-11-16 10:26:26
你是把稻谷粉碎之后提取得到的蛋白质？你是通过将提取液的pH调节成酸性使一部分非目标蛋白质沉淀，离心取可溶性蛋白质；再将可溶性蛋白质溶液的pH调节成碱性使一部分非目标蛋白质沉淀，离心取可溶性蛋白质；此时得到 ...

嗯嗯差不多，就是先用碱溶解原料，使碱溶性蛋白溶解，再用酸调到蛋白等电点，使蛋白沉淀，要这个沉淀的蛋白，然后再去过DEAE纯化它

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
12楼2022-11-17 15:00:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
引用回帖:
12楼: Originally posted by rzrzbs at 2022-11-17 15:00:57
嗯嗯差不多，就是先用碱溶解原料，使碱溶性蛋白溶解，再用酸调到蛋白等电点，使蛋白沉淀，要这个沉淀的蛋白，然后再去过DEAE纯化它
...

为什么要用碱去溶解谷物？虽然有能耐受碱性的蛋白质，但耐受程度有限，你需要的蛋白质不一定能耐受，也许会变性沉淀，那你后来再跑电泳就自然没有这个蛋白质了。

你说的情况还不够详细，建议说得更详细。

建议你联系版主把这个帖子转移到“生物科学”版块，因为生物学是实验学科，大多数都没空来这个“有奖问答”版块，你发错版块了。不光没什么人回帖，还有版主把EPI授予了一个答非所问的回帖。
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

rzrzbs
流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
13楼2022-11-23 01:17:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rzrzbs

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
13楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2022-11-23 01:17:19
为什么要用碱去溶解谷物？虽然有能耐受碱性的蛋白质，但耐受程度有限，你需要的蛋白质不一定能耐受，也许会变性沉淀，那你后来再跑电泳就自然没有这个蛋白质了。

你说的情况还不够详细，建议说得更详细。

建 ...

哈哈哈哈哈好的，太谢谢您了

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
14楼2022-11-24 14:35:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

愿好_

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2022-11-09 21:28:08
这个填料不太强，我从来不敢用这么碱性的溶液。

用考马斯亮蓝测得出来的蛋白质不一定是没有变性的蛋白质，要看看测定原理。

文献里的蛋白质和你的蛋白质不一定一样，除非氨基酸序列一样。

你好啊虫友们，我想问一下，冲出柱子后必须用考马斯亮蓝测吸光度吗？可不可以直接测280nm下的吸光度呀？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
15楼2024-07-18 00:27:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
引用回帖:
15楼: Originally posted by 愿好_ at 2024-07-18 00:27:22
你好啊虫友们，我想问一下，冲出柱子后必须用考马斯亮蓝测吸光度吗？可不可以直接测280nm下的吸光度呀？
...

280nm测定得到的不一定是蛋白质，也有色素、黄酮等等。
赞一下 回复此楼
流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
16楼2024-07-18 10:38:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 rzrzbs 的主题更新
162/2返回列表上一页12
不应助 确定回帖应助 (注意：应助才可能被奖励，但不允许灌水，必须填写15个字符以上)
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 4/200 2026-10-01 21:07 by Equinoxhua
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 (EPI+-1)(金币-50) +3 cqwQDCxMcL3I 2026-09-29 4/200 2026-09-30 16:52 by Z9YWQ5EAO3qp
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 cqwQDCxMcL3I 2026-09-29 4/200 2026-09-30 16:45 by Z9YWQ5EAO3qp
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 cqwQDCxMcL3I 2026-09-29 6/300 2026-09-30 16:14 by Z9YWQ5EAO3qp
[教师之家] 某top大学教授说“能够在市场中兑现的能力才是真能力”无比同意！ +10 zju2000 2026-09-26 13/650 2026-09-30 10:26 by yexuqing
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:47 by yCO1Ll7aHtsw
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:37 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 16:30 by etmYJ6d2rquH
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 4/200 2026-09-29 15:15 by etmYJ6d2rquH
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 6/300 2026-09-29 14:41 by etmYJ6d2rquH
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:30 by etmYJ6d2rquH
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 6/300 2026-09-29 14:13 by etmYJ6d2rquH
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 5/250 2026-09-29 13:50 by etmYJ6d2rquH
[教师之家] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 4/200 2026-09-29 09:49 by JzYBbHIXWSrW
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:28 by ZvyPK8n6Nfki
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-28 23:46 by b8fCuTHqckEt
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 6/300 2026-09-28 22:15 by ez6fGg9abYaj
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 18:51 by 9lS3ad5oOymn
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭