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ahugecat

银虫 (小有名气)

[交流] ELISA 试剂盒问题

大家好,请教个ELISA问题。
是这样的,我们课题组买了个测free PSA的试剂盒,用得不错。一年后,试剂盒升级了,操作时间缩短了,没有原先的zero buffer incubation,rinse步骤减少了一回。结果是样品应该测得浓度小于1的,部分血清样竟然高达3,6,甚至20。联系公司后,公司重新提供了一批抗体,结果这回测得浓度都基本趋于0。而两次标准曲线都一切正常,标曲是由公司配制提供的。

是solid phase direct sandwich ELISA method. 包被的是f-PSA单抗,二抗是anti-f-PSA-HRP,底物是TMB,450nm读数。

大家认为这会是什么原因引起?谢谢!
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ahugecat

银虫 (小有名气)

血清是直接加的,没有样品处理步骤
4楼2009-09-17 13:09:44
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ahugecat

银虫 (小有名气)

注:其实第一次测的时候60%的值还是落在正常范围的,第二次测的时候就全是接近0了(不管是新样品还是老样品)。他们提供的是酶标抗体,板买来就是包被好的,fPSA单抗包被的。
2楼2009-09-16 11:06:41
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poog502

木虫 (正式写手)

建议做一下回收率(比如激素含量)的对照试验,一切就可以证明了。
3楼2009-09-16 14:54:15
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