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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » ELISA 试剂盒问题
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ahugecat

银虫 (小有名气)

[交流] ELISA 试剂盒问题

大家好，请教个ELISA问题。
是这样的，我们课题组买了个测free PSA的试剂盒，用得不错。一年后，试剂盒升级了，操作时间缩短了，没有原先的zero buffer incubation,rinse步骤减少了一回。结果是样品应该测得浓度小于1的，部分血清样竟然高达3，6，甚至20。联系公司后，公司重新提供了一批抗体，结果这回测得浓度都基本趋于0。而两次标准曲线都一切正常，标曲是由公司配制提供的。

是solid phase direct sandwich ELISA method. 包被的是f-PSA单抗，二抗是anti－f-PSA-HRP,底物是TMB,450nm读数。

大家认为这会是什么原因引起？谢谢！
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1楼 2009-09-15 07:30:30
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ahugecat

银虫 (小有名气)
注：其实第一次测的时候60％的值还是落在正常范围的，第二次测的时候就全是接近0了（不管是新样品还是老样品）。他们提供的是酶标抗体，板买来就是包被好的，fPSA单抗包被的。
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2楼2009-09-16 11:06:41
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poog502

木虫 (正式写手)
建议做一下回收率（比如激素含量）的对照试验，一切就可以证明了。
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3楼2009-09-16 14:54:15
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ahugecat

银虫 (小有名气)
血清是直接加的，没有样品处理步骤
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4楼2009-09-17 13:09:44
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