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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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过而知之者

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】葡聚糖G-15测定寡肽分子量问题

葡聚糖凝胶G-15,玻璃层析柱:70cm×1.6cm,流动相超纯水,流速:0.5mL/min,检测波长280nm。
标准品:牛血清白蛋白组分五 MW68000,VB12  MW1335,氧化型谷胱甘肽  MW635,L-酪氨酸  MW181.
------------------------------------------------
问题:1.牛血清蛋白组分五一直没有出现过洗脱峰,但在普通分光光度计280nm有吸收。这是为什么?
           2.VB12、氧化型谷胱甘肽、L-酪氨酸三者的洗脱体积依次为135mL、97mL、142mL,也就是说分子量最大的VB12的洗脱体积比氧化型谷胱甘肽的洗脱体积还要大,理论上说是不可能的,重复试验依然是同样的结果。这是为什么?

对于第一个问题我想是因牛血清组分五的分子量远大于G-15分离上限而导致根本不能通过层析柱造成,这样解释不知道对不对?第二个问题至今没解决,对以上两个问题希望高手虫友帮忙分析一下!!在此先谢过了!
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ffan023

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你是混合进样的还是单独进样?
潜心修炼,早日化蝶。
2楼2009-09-15 19:16:43
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过而知之者

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by ffan023 at 2009-9-15 19:16:
你是混合进样的还是单独进样?

=======
我是单独进样的!谢谢你回复,我那天等了一整天没人回答,昨天也没上了。
3楼2009-09-16 16:24:34
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chn12503171

银虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我感觉你最好全部用多肽作为标准品试一下
4楼2009-09-19 16:06:10
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peakfly

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
杆菌肽(Mw=1442)、氧化型谷胱甘肽(Mw=612)、还原型谷胱甘肽(Mw =307)、牛血清白蛋白(Mw=68000)
认真做事能够把事做对,用心做事才能把事情做好!
5楼2009-09-19 17:20:37
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过而知之者

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by chn12503171 at 2009-9-19 16:06:
我感觉你最好全部用多肽作为标准品试一下

谢谢,我准备这样做了!
6楼2009-09-24 15:55:07
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