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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 【求助】葡聚糖G-15测定寡肽分子量问题
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过而知之者

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】葡聚糖G-15测定寡肽分子量问题

葡聚糖凝胶G-15，玻璃层析柱：70cm×1.6cm，流动相超纯水，流速：0.5mL/min，检测波长280nm。
标准品：牛血清白蛋白组分五 MW68000，VB12  MW1335，氧化型谷胱甘肽  MW635，L-酪氨酸  MW181.
------------------------------------------------
问题：1.牛血清蛋白组分五一直没有出现过洗脱峰，但在普通分光光度计280nm有吸收。这是为什么？
           2.VB12、氧化型谷胱甘肽、L-酪氨酸三者的洗脱体积依次为135mL、97mL、142mL，也就是说分子量最大的VB12的洗脱体积比氧化型谷胱甘肽的洗脱体积还要大，理论上说是不可能的，重复试验依然是同样的结果。这是为什么？

对于第一个问题我想是因牛血清组分五的分子量远大于G-15分离上限而导致根本不能通过层析柱造成，这样解释不知道对不对？第二个问题至今没解决，对以上两个问题希望高手虫友帮忙分析一下！！在此先谢过了！
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1楼 2009-09-14 11:00:32
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ffan023

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你是混合进样的还是单独进样？
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潜心修炼，早日化蝶。
2楼2009-09-15 19:16:43
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过而知之者

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by ffan023 at 2009-9-15 19:16:
你是混合进样的还是单独进样？

=======
我是单独进样的！谢谢你回复，我那天等了一整天没人回答，昨天也没上了。
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3楼2009-09-16 16:24:34
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chn12503171

银虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我感觉你最好全部用多肽作为标准品试一下
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4楼2009-09-19 16:06:10
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peakfly

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
杆菌肽(Mw=1442)、氧化型谷胱甘肽(Mw=612)、还原型谷胱甘肽(Mw =307)、牛血清白蛋白（Mw=68000）
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认真做事能够把事做对，用心做事才能把事情做好！
5楼2009-09-19 17:20:37
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过而知之者

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by chn12503171 at 2009-9-19 16:06:
我感觉你最好全部用多肽作为标准品试一下

谢谢，我准备这样做了！
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6楼2009-09-24 15:55:07
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