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蛋白断裂或者降解会影响蛋白的浓度么？ 已有2人参与
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如题，各位大神，蛋白浓缩完成后用Bradford进行定量。根据定量结果取2ug跑胶，但是跑胶出来的条带大概有三四条，都在目标分子量处，且条带都很细，跟2ug的BSA条带对比，感觉目标泳道的条带细且浅，但是是多条的。 但，之前的纯化图的泳道中只有一条较粗的目的条带。 以上是背景，现在怀疑是不是定量偏高，导致定量后跑的条带情况要弱？ 第二点，定量后跑胶条带出现了多条，怀疑蛋白是不是断裂或者降解了，若是的话，断裂或者降解后的蛋白浓度会发生变化么？（这个问题是我比较想知道的  ）跪求各位大神的指点  |
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fuyuandj86
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【答案】应助回帖
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我要睡觉: 金币+10, ★★★很有帮助 2022-09-21 15:48:11
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这个问题要分两个方面来说，一个是蛋白降解会不会影响蛋白的实际浓度；另一个是蛋白降解会不会影响浓度的测量。 蛋白降解或者断裂了当然会影响目的蛋白的浓度。如果你说的蛋白指的是总蛋白浓度的话，末端一些片段的被切割不会影响摩尔浓度，但会影响质量浓度(mg/ml)。 至于一个蛋白变成两段或多段以后和断裂前，测量的表观浓度有没有差别，这取决于测量方法。如果断裂不是很严重，测量的总蛋白表观浓度不会有明显差别。如果严重断裂，一般来说用BCA和Bradford法测得的总蛋白表观浓度会小一些，用UV280测得的表观浓度不变。 |
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我要睡觉
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