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流式荧光崔

新虫 (初入文坛)

[交流] 抗体标记过程用的缓冲液如何配置

大家好,我是流式荧光崔工,一个旨在链接与流式荧光相关的朋友,一起赚钱、一起学习、一起工作、一起生活的靓仔。


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苏州的L老师,刚开始做藻红蛋白标记抗体实验,前几天问了崔工一个问题。

崔工,你家的PE冻干粉怎么溶解?用什么溶解?

后面添加崔工账号的老师可能有疑虑了,苏州的L老师问的是什么问题,PE冻干粉是什么?只听说过PE,没有听说过PE冻干粉,PE冻干粉是什么?

从后台数据可以看到,最近添加崔工这个破账号的老师多了很多。

崔工给新来的老师们讲下。

市面上关于PE的形态有晶体、沉淀、冻干粉、预活化好的冻干粉。

各种形态的PE有什么区别呢?

看下下面这张图就比较清晰了。

图片



从图中可以看出L老师说的是第二种,冻干粉形态的PE。

它的特征是不需要脱盐,使用时直接加入PBS或者纯净水溶解,再用SMCC活化就可以了。

我们再从上面的图可以看出,SMCC预活化的PE冻干粉使用起来是最方便的。

它不仅不需要脱盐,还不需要预活化。

在交联抗体的实验中,老师们根本不用管PE,把抗体处理好后,用PBS溶解PE,再与抗体混合反应就可以了。

它们的方便程度是SMCC预活化PE冻干粉>PE冻干粉>沉淀=晶体。

— 2 —

我们再来回答L老师的问题。

L老师订购的是PE冻干粉,其实无论是沉淀、晶体、冻干粉还是预活化的冻干粉,都涉及到一个溶解液的问题。

这也是L老师询问的问题。

崔工家经常帮老师们做抗体标记实验,对实验过程还是比较了解的。

在为老师们标记的时候,为了方便,提高效率,我们在标记的时候选择的是SMCC预活化好的PE冻干粉。

溶解液用的是PBS缓冲液。

缓冲液的配方如下,供大家参考:

0.1 摩尔/升磷酸盐缓冲液

0.15 摩尔/升氯化钠

PH值7.2-7.4

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