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小蛀虫张

铁虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 18.5
帖子: 10
在线: 5.6小时
虫号: 15277647

[交流] 金黄色葡萄球菌胞内碱性磷酸酶（AKP）的测定

大家好：
最近一直在测金葡中碱性磷酸酶的活性，具体试验是：将细胞悬液于1.5 mL塑料管中，在冰水浴，300W的超声强度下超声3s，间隔10s，共30次。之后按照磷酸苯二钠法测定，酶活。结果却在510 nm处一直没有吸光度。不知道问题出在哪里。反应体系的PH值为10，属于AKP酶的最适PH。
有大神可以指导一下吗？

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1楼 2022-08-26 15:29:50

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

周西西a

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 85.3
帖子: 42
在线: 3.1小时
虫号: 29592399

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

我也在做测定金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的碱性磷酸酶，我是用我自己合成的化合物来作用这两种菌，我之前测定过上清液，和考马斯亮蓝反应之后测定蛋白浓度是有变化的，然后我就想同理的是他能破坏细胞，然后里面的碱性磷酸酶就出来了，我用的是pnpp（4-硝基苯磷酸二钠）为底物，用的碳酸钠-碳酸氢钠为底液，查的文献和一些试剂盒上显示的是在405-420之间有吸光度，一开始测了pnpp的全波长，然后又测定了和pnpp反应之后的全波长，在405-420nm也没有吸收峰，我想我们可以简单讨论一下。