应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 利用无缝克隆构建重组转化子，效率真高，转化子筛选8个全对
101/1返回列表
查看: 1544  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 青椒之路 的 1 个金币 ，回帖就立即获得 1 个金币，每人有 1 次机会

青椒之路

铜虫 (正式写手)

[交流] 利用无缝克隆构建重组转化子，效率真高，转化子筛选8个全对

利用无缝克隆构建重组转化子，效率真高，转化子筛选8个全对

无缝克隆技术是一种新的、快速、简洁的克隆方法，可以在质粒的任何位点进行一个或多个目标 DNA 的片断的插入，而不需要任何限制性内切酶和连接酶。 突破传统的双酶切再加上连接，只需要一步重组法，即可得到高效率克隆的重组载体，大大提高了工作效率传统克隆

• PCR 引物设计需引入载体上的酶切位点，PCR 产物再经过酶切、胶回收、连接后定向克隆到目的载体上；
• 需要查找合适的酶切位点，购买各种内切酶；
• 阳性率低；
• 多个片段，通常只能分多次拼接。
无缝克隆
• 只需要一次反应即可完成定向克隆，省略酶切、酶连等过程；
• 对酶切位点无要求，可以把目的片段插入到任意载体的任意位点；
• 连接片段之间不会引入任何其他序列；
• 可以同时克隆多个片段。
无缝克隆的优势

相较于传统克隆的方式，有几点显而易见的优势：

1. 可以不需要任何限制性内切酶、连接酶，也不需要磷酸化、末端补平等操作；
2. 可同时连接多个 DNA 片段，最多可达 10 个；
3. 不附加任何多余序列，精确定向连接；
4. 体系反应时间仅需 15-30 min，快速反应。

利用无缝克隆构建重组转化子，效率真高，转化子筛选8个全对
1.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2022-08-21 10:01:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

超级老快

木虫之王 (文学泰斗)
★
青椒之路(金币+1): 谢谢参与
qqqqq

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
3楼2022-08-21 10:49:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kurena

金虫 (正式写手)
★
青椒之路(金币+1): 谢谢参与
是新出的产品吗

发自小木虫Android客户端
回复此楼
4楼2022-08-21 19:47:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

766482434

禁言 (初入文坛)
★
青椒之路(金币+1): 谢谢参与
本帖内容被屏蔽
8楼2022-08-23 11:03:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

AD_com

金虫 (小有名气)
★
青椒之路(金币+1): 谢谢参与
少见多怪
回复此楼
10楼2022-10-08 11:49:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
tzynew2楼
2022-08-21 10:04   回复  
青椒之路(金币+1): 谢谢参与
o 发自小木虫Android客户端
XG-WUST5楼
2022-08-21 22:27   回复  
青椒之路(金币+1): 谢谢参与
up 发自小木虫IOS客户端
miaojiabing6楼
2022-08-21 23:12   回复  
青椒之路(金币+1): 谢谢参与
假大空7楼
2022-08-22 16:38   回复  
青椒之路(金币+1): 谢谢参与
顶
zhlgyy9楼
2022-09-27 09:51   回复  
青椒之路(金币+1): 谢谢参与
祝福 发自小木虫Android客户端
相关版块跳转 我要订阅楼主 青椒之路 的主题更新
101/1返回列表
提示: 如果您在30分钟内回复过其他散金贴，则可能无法领取此贴金币
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭