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薏米米咩

新虫 (初入文坛)

[求助] 微生物求助 已有2人参与

我最近在做新金色分枝杆菌的电转化实验，感受态重新做了好几次，质粒也验证过没有问题，但是电转化后始终长不出单克隆，请问大家这会是什么原因？

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1楼 2022-08-19 11:40:13
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LZ36

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

可以把质粒线性化看看，
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3楼2022-09-21 17:45:30
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smokedfish

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可能性1：你的穿梭载体复制子区域发生突变，或者该载体不能在你转化的菌种复制；
可能性2：由于你的菌存在限制修饰系统，可以在体外甲基化你的质粒，再转化；
可能性3：电转过程中的问题，试一试加大质粒量和延长复苏时间。
希望能有所帮助~
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井底之蛙
2楼2022-08-20 15:07:06
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薏米米咩

新虫 (初入文坛)
小片段导入了，但是超过1万后就一直导不进去

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4楼2022-10-10 15:12:42
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