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薏米米咩

新虫 (初入文坛)

[求助] 微生物求助 已有2人参与

我最近在做新金色分枝杆菌的电转化实验,感受态重新做了好几次,质粒也验证过没有问题,但是电转化后始终长不出单克隆,请问大家这会是什么原因?

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smokedfish

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可能性1:你的穿梭载体复制子区域发生突变,或者该载体不能在你转化的菌种复制;
可能性2:由于你的菌存在限制修饰系统,可以在体外甲基化你的质粒,再转化;
可能性3:电转过程中的问题,试一试加大质粒量和延长复苏时间。
希望能有所帮助~
井底之蛙
2楼2022-08-20 15:07:06
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LZ36

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

可以把质粒线性化看看,
3楼2022-09-21 17:45:30
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薏米米咩

新虫 (初入文坛)

小片段导入了,但是超过1万后就一直导不进去

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4楼2022-10-10 15:12:42
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