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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 切片相关 » 冰冻切片的心脏组织冻伤
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如婳Sunshine

新虫 (初入文坛)

[求助] 冰冻切片的心脏组织冻伤

今天切22年8月4日取材的心脏组织，取材过程是深度麻醉小鼠后心脏取血，后取出心脏，挤压多余残留血液后用包埋剂OCT充盈心脏，再浸泡在装有OCT的锡箔纸槽中，液氮速冻（液氮没有漫过锡箔纸槽边缘，仅是底部薄薄一层），后将速冻好的组织转移致-80度冰箱保存。
今天用冰冻切片机切心脏时，发现组织呈现类似冻伤的状态，且易碎，看起来就像是石蜡组织过度脱水导致组织样品皲裂、易碎。但是我实在不明白到底哪一步出了问题，非常怕下次再犯这种错误。恳请大家救救我啊啊啊。
链接: https://pan.baidu.com/s/1IV6CXvAsHmyWrrksXWagIQ 提取码: ndem 复制这段内容后打开百度网盘手机App，操作更方便哦

不知道为啥传不了图片，只能整个网盘了，烦请大家帮忙看一下，感激不尽
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1楼 2022-08-18 01:11:26
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如婳Sunshine

新虫 (初入文坛)
求大神帮忙找找原因，玻璃心今天晚上睡不着了快
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2楼2022-08-18 01:13:06
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404991634

至尊木虫 (著名写手)
建议不要挤压残留的血液，用生理盐水，多甲简单快速灌注，这个过程很快而且不麻烦的

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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

如婳Sunshine
无所畏惧
3楼2022-08-18 08:08:52
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如婳Sunshine

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 404991634 at 2022-08-18 08:08:52
建议不要挤压残留的血液，用生理盐水，多甲简单快速灌注，这个过程很快而且不麻烦的

谢谢前辈建议，我们这边的普遍操作是冰切后把粘上组织的切片泡在多甲里，取材时就不灌流了直接包埋到OCT里，液氮速冻。切片的时候那个心脏切面像是冻伤了一样，紫黑紫黑的


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4楼2022-08-18 09:24:05
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404991634

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 如婳Sunshine at 2022-08-18 09:24:05
谢谢前辈建议，我们这边的普遍操作是冰切后把粘上组织的切片泡在多甲里，取材时就不灌流了直接包埋到OCT里，液氮速冻。切片的时候那个心脏切面像是冻伤了一样，紫黑紫黑的

...

一个注射器搞定的事情，可以做个预实验对比一下
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无所畏惧
5楼2022-08-18 11:46:10
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倾心987

新虫 (著名写手)
如果你接下来做的实验，血液没有太大影响，完全可以不用按压，其次，切片是一般-20度左右，你从-80拿出来最好复温一下

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6楼2022-09-30 08:31:26
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