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如婳Sunshine

新虫 (初入文坛)

[求助] 冰冻切片的心脏组织冻伤

今天切22年8月4日取材的心脏组织,取材过程是深度麻醉小鼠后心脏取血,后取出心脏,挤压多余残留血液后用包埋剂OCT充盈心脏,再浸泡在装有OCT的锡箔纸槽中,液氮速冻(液氮没有漫过锡箔纸槽边缘,仅是底部薄薄一层),后将速冻好的组织转移致-80度冰箱保存。
今天用冰冻切片机切心脏时,发现组织呈现类似冻伤的状态,且易碎,看起来就像是石蜡组织过度脱水导致组织样品皲裂、易碎。但是我实在不明白到底哪一步出了问题,非常怕下次再犯这种错误。恳请大家救救我啊啊啊。
链接: https://pan.baidu.com/s/1IV6CXvAsHmyWrrksXWagIQ 提取码: ndem 复制这段内容后打开百度网盘手机App,操作更方便哦

不知道为啥传不了图片,只能整个网盘了,烦请大家帮忙看一下,感激不尽
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如婳Sunshine

新虫 (初入文坛)

求大神帮忙找找原因,玻璃心今天晚上睡不着了快
2楼2022-08-18 01:13:06
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404991634

至尊木虫 (著名写手)

建议不要挤压残留的血液,用生理盐水,多甲简单快速灌注,这个过程很快而且不麻烦的

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无所畏惧
3楼2022-08-18 08:08:52
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如婳Sunshine

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 404991634 at 2022-08-18 08:08:52
建议不要挤压残留的血液,用生理盐水,多甲简单快速灌注,这个过程很快而且不麻烦的

谢谢前辈建议,我们这边的普遍操作是冰切后把粘上组织的切片泡在多甲里,取材时就不灌流了直接包埋到OCT里,液氮速冻。切片的时候那个心脏切面像是冻伤了一样,紫黑紫黑的


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4楼2022-08-18 09:24:05
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404991634

至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 如婳Sunshine at 2022-08-18 09:24:05
谢谢前辈建议,我们这边的普遍操作是冰切后把粘上组织的切片泡在多甲里,取材时就不灌流了直接包埋到OCT里,液氮速冻。切片的时候那个心脏切面像是冻伤了一样,紫黑紫黑的

...

一个注射器搞定的事情,可以做个预实验对比一下
无所畏惧
5楼2022-08-18 11:46:10
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倾心987

新虫 (著名写手)

如果你接下来做的实验,血液没有太大影响,完全可以不用按压,其次,切片是一般-20度左右,你从-80拿出来最好复温一下

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6楼2022-09-30 08:31:26
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