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大肠杆菌原核表达，菌液直接SDS-PAGE跑不出来条带，求助已有2人参与
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最近在做原核表达，大肠杆菌诱导后做SDS-PAGE，其中菌液直接跑胶上个月还能做出来，突然有一天跑不出来了，怀疑是自己操作问题。 但是超声后的上清依然有目的蛋白表达，请问各位是什么原因？ 我的样品处理是这样的： 1 取诱导后菌液，8000g5min离心，弃上清，PBS重悬再8000g5min离心，弃上清； 2 沉淀用25%原体积的裂解buffer重悬后，+蛋白上样buffer，95℃煮沸5min，12000g离心2min，取上清上样 |
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13楼2022-09-07 11:11:20